大鼠脂肪干细胞分离培养及成脂成骨分化潜能的研究

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1、原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。储签名还丝/日期:净二鲤关于学位论文使用授权说明本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅;学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文;学校可根据国家或湖南省有关

2、部门规定送交学位论文。作者签“:恻肠嘟叠喃期:毕』，硕士学位论文中文摘要中文摘要目的:研究脂肪干细胞(adiposetissue一derivedstemeells，ADsCs)在体外分离培养和在一定条件下诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞的能力，探讨其作为骨组织工程细胞的可行性。方法:无菌切取SD大鼠腹股沟处的皮下脂肪，I型胶原酶消化法获取原代脂肪干细胞，接种至含10%胎牛血清的DMEM培养液，培养并适时传代，每日在倒置显微镜下观察并记录细胞形态和增殖特征。第3代细胞分别在成脂成骨诱导液中诱导分化，并采用油红染色，碱性磷酸酶(ALP)染色，vonKossa

3、染色进行鉴定。结果:从大鼠脂肪组织中分离出的脂肪干细胞，在体外呈成纤维细胞样迅速增殖，可在异丁基一甲基黄嘿吟、地塞米松、胰岛素等诱导下，表现出脂肪细胞特性;可以在地塞米松、抗坏血酸、p一甘油磷酸钠的诱导下，表现出成骨细胞特性，该细胞碱性磷酸酶(ALP)染色ALP活性显著增高，VonKossa染色出现矿化结节。结论:ADSCs易于在体外分离培养，并扩增迅速，其生物学特性稳定，经成脂诱导可分化为脂肪细胞，经成骨诱导可分化为成骨细胞，可作为骨组织工程的种子细胞。关键词:脂肪干细胞，大鼠，成脂诱导，成骨诱导硕士学位论文英文摘要AbstraCtobjeetiv

4、e:Toisolate，eultivateadultratadiPose一derivedstemeells(ADSCs)，andtoexPloredthePossibilityofindueingADSCstoadiPogenesisandosteogenesisinsPeeificdifferentiationmedium.InvestigatefeasibilityofADSCsforbonetissueengineeringeell.Methods:TheadiPosetissuewasobtainedfromtheinguinalfatPad

5、sofadultrats.PrimaryADSCswereisolatedbythemethodsofeollagenaseldigestionsubsequently.InoculatePrimaryADSCstoDMEMeulturemedium，eultivanteandPassage.ObserveeellmorphologyandProliferationcharacteristicsundertheinvertedmicroseoPeeveryday.ThethirdPassageofADSCsWasindueedtodifferenii

6、ateafterexPosuretoadiPocytieorosteogeniemedium.The011Red0staining，alkalinePhosPhatase(ALP)andVonKossastainingwereusedtodeteettheresults.Results:TheadiPose一derivedstemcellsisolationedfromratadiPosetissue，anditsraPidgrowthandProliferationinvitro，werefibroblast一likeeellgrowth.Inis

7、obutyl一methyl一xanthine，dexamethasone，insulinindueed，thePerformaneecharaeteristicsiniofateells.Indexamethasone，ascorbieaeid，p一glyeeroPhosPhateinduced，Performanceintoosteoblastcharacteristics.Increasingofalkaline硕士学位论文英文摘要PhosPhatase(ALP)aetiuitysignifinallyaPPearaneeofealeiumnod

8、eshowedunderVonKossastaining.Conelusions:ADSCseasyisol