神经干细胞体外培养鉴定及诱导分化的表型特征.pdf

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1、中国组织工程研究第79卷笫19期2015—05—07出版ChineseJournalofTissueEng~eenngResearchMay2015VoL19,No.19WWW.CRTER.org神经干细胞体外培养鉴定及诱导分化的表型特征刘吉星,侯博儒,杨文桢,马浚宁,严贵忠,陈四化,尹立山,王刚,任海军(兰州大学第二医院神经外科,甘肃省兰州市730030)文章亮点:1以神经球为基本观察单位,进行了神经干细胞的鉴定,重点观察了诱导分化不同时间段神经球的形态学变刘吉星,男,1990年生,化。湖北省荆门市人,汉族,2在神经干细胞鉴定及分化表型确认的过程中采取多重免疫荧光复合染色增加了实验数据

2、的准确性。兰州大学在读硕士,主要从事神经干细胞治疗颅脑3实验成功地从新生鼠海马、嗅球中提取出神经干细胞,连续培养得到了稳定悬浮的神经球,通过破坏其悬外伤基础方面的研究。浮特性、不换液诱导神经干细胞分化为神经元和星形胶质细胞。关键词:通讯作者:任海军,教授,于细胞:神经于细胞;神经元:星形狡质细跑:神经球}巢蛋a:8一微管蛋白lI:铰质纾维酸性蛋a:分化硕士生导师,主任医师,表垫兰州大学第二医院神经外科,甘肃省兰州市主题词:730030神经干细胞:幸孛经元:微管蛋白基金资助:中图分类号:R3942甘肃电信萃英科研基金资助项g(Izudxcy-2014-81文献标识码:B文章编号:2095-

3、4344(2015)19.03054-07摘要稿件接受:2015-04-18背景:神经干细胞促进受损中枢神经系统结构和功能再修复具有广阔的应用前景,而进行神经干细胞体外培http:/WWW.crter.org养鉴定及诱导分化表型的研究是实现这一应用的基础。目的:观察神经干细胞在体外培养条件下的生物学特性和分化表型特点。方法:从新生小鼠海马、嗅球提取神经干细胞。选取3代后稳定的神经干细胞采用BrdU进行标记,并进行BrdU+巢蛋白+Hochest33258免疫荧光复合染色对神经干细胞进行鉴定。体外诱导促使神经干细胞贴壁分化,对分化产生的子代细胞进行BrdU、B一微管蛋白IⅡ、胶质纤维酸性蛋

4、白、Hochest33258复合免疫荧光染色确定分化表型。结果与结论:来源于新生鼠海马及嗅球的细胞连续传代培养后可形成稳定悬浮的类球状细胞团,且BrdU+巢蛋白免疫荧光双染阳性。神经干细胞体外诱导贴壁分化后可产生B微管蛋白Ⅲ、胶质纤维酸性蛋白阳性的子代细胞。以上结果表明体外培养的神经干细胞具有很强的自我增殖更新的能力,在培养过程中趋向于形成稳定的神经球,经体外诱导通过不对称细胞增殖、分化产生神经元和星形胶质细胞等细胞表型。文lj吉星.侯蹲儒.杨文桢.马浚宁.严贵悫.陈西纯。尹立山.王.任海军辛孛经于缅泡体钋培养鉴定及诱导分化的表銎特匝【J】.中国组织I程研究.2015。19(19):30

5、54-3060.doi:l0.3969~.issn.2095-4344.2015.19.018Neuralstemcells:/nv/troculture,identificationanddiferentiatedphenotypeLiuJi-xing,HouBo—ru,YangWen-zhen,MaJun—ning,YanGui-zhong,ChenSi—hua,YinLi—shan,WangGang,RenHai-jun(DepartmentofNeurosurgery,theSecondHospitalofLanzhouUniversityLanzhou730030,GansuP

6、rovince,China)AbstractBACKGROUND:NeuralstemcellscanrepairthedamagedcentraInervoussystemstructureandfunction.whichLiuJi-xing,Studyingforhavebroadapplicationprospects.Itcanberealizedbystudiesoninvitroculture.identificationanddifferentiationmaster’sdegree,Departmentofphenotypeofneuralstemcalls.Neuro

7、surgery,theSecondOBJECTI、,E:TOobservethebiologicalcharacteristicsanddiferentiatedphenotypesofneuralstemcellsunderHospitalofLanzhouUniversity,induction/nv/tro.Lanzhou730030,GansuProvince.ChinaMETHODS:NeuraIstemcallswere

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