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《cav-1对人脐静脉内皮细胞中mcp-1表达的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、华中科技大学硕士学位论文OurresultsshowthatsilenceofCAV-1caninhibittheexpressionofMCP-1inducedbyox-LDLinendothelialcells.ItsuggeststhatCAV-1mayplayanimportantroleinthesignalingpathwayofox-LDL-inducedendothelialdysfunction.WewillfurtherinvestigatethattheroleofCAV-1int
2、heLOX-1mediatedsignaltransductionbymutant’sconstruction,FRETandothertechnologies.Keywords:AtherosclerosisOx-LDLCAV-1siRNAMCP-1HUVEC4华中科技大学硕士学位论文研究背景动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)是多发性疾病,其病理改变以动脉内脂质沉积,粥样斑块形成及伴随的炎症反应为特征,造成血管部分或完全堵塞进而导致心、脑、肾等多器官缺血、梗死,给人类健康造成极大的危
3、害。在AS血管的管壁,单核细胞黏附于血管壁并穿入内皮下形成泡沫细胞是动脉粥样硬化的早期病变,而平滑肌细胞增生、迁移形成平滑肌源性泡沫细胞是该病较晚期病变。这两种泡沫细胞的形成与单核细胞趋化蛋白-1(monocytechemoattractantprotein-1,MCP-1)密切相关。大量研究表明单核细胞的趋化主要由MCP-1来实现,多种物质及细胞因子都可以诱导MCP-1的表达,而MCP-1也可在多种细胞尤其是构成动脉粥样硬化病变的三种主要细胞——单核细胞、内皮细胞和平滑[1]肌细胞中表达。大量的研究表
4、明,氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein,ox-LDL)[2]在AS的病理过程中起着重要的作用，如ox-LDL能够刺激内皮细胞多种炎性因子和黏附分子的表达，诱导单核细胞黏附和迁移进入动脉内膜并转化为巨噬细胞；加剧动脉粥样硬化的炎症反应等。Ox-LDL的受体家族成员中有多种清道夫受体:如A类清道夫受体、B类清道夫受体、CD36、CD68等。其中血凝素样氧化低密[3]度脂蛋白受体-1是Sawanura等在1997年新发现的存在于血管内皮细胞表面的ox-LDL特异性受体
5、,是血管内皮细胞摄取和代谢ox-LDL的主要受体。研究发现血凝素样氧化低密度脂蛋白受体(Lectin-likeoxidizedlowdensitylipoproteinreceptor-1,LOX-1)，在动脉粥样硬化的早期，血管内皮细胞表达LOX-1比进展期[4]更活跃，这与AS早期血管内皮细胞大量表达MCP-1，从而促进单核细胞向内皮细胞粘附、迁移的病理过程一致。有研究表明：当人冠状动脉内皮细胞与Ox-LDL共同培养24小时后明显增加了MCP-1和LOX–1的表达以及单核细胞向内皮细胞[5]的黏附；
6、但如果预先加入反义LOX–1mRNA则可抑制上述过程。这些研究结果提示在AS早期，LOX-1与ox-LDL结合后,可能对激活内皮细胞并诱导内皮细胞分泌MCP-1起着重要的作用。[6]而有研究显示，LOX-1为Ⅱ型跨膜蛋白受体，在静息状态下以单体形式存在，5华中科技大学硕士学位论文[7]结构分析显示LOX-1胞内段无SH2域，且不与G蛋白偶联，但由LOX-1介导激活[8·9]的信号途径主要为酪氨酸蛋白激酶途径及G蛋白介导的PKC信号途径，因此LOX-1如何活化、如何介导信号的跨膜转导、进而激活哪些信号途径
7、均有待进一步研究。细胞质膜小凹（caveolae）是细胞膜上的一种特殊的囊泡状凹陷结构，其已知的功能主要包括胞饮、胞吐、调节细胞内信号转导和维持细胞内胆固醇平衡四个[10]方面。CAV-1几乎存在于所有与AS形成有关的细胞类型中,包括内皮细胞,巨噬细胞和平滑肌细胞,在AS形成中起着重要的作用。我们已知小凹蛋白-1（Caveolin-1，CAV-1）通过它的脚手架区(CaveolinScaffoldingdomain,CSD)来结合并影响信号分子,受Caveolin-1调节的信号分子都有一个Caveoli
8、n结合区域(Caveolin-bindingdomains,CBD),CSD与所调节蛋白的CBD直接作用抑制信号分子的活性。Caveolin-1是信号分子的支架蛋白和负性调节蛋白。CAV-1的“脚手架”区域突变分析:此区域有5个关键的残基部位与它抑制信号分子的活性相关:Phe89、Phe92、Thr93、Trp98、Phe99。近年来研究表明:CAV-1主要和G2蛋白α亚基的无活性的GDP合酶,CAV-1可抑制内皮一氧化氮合酶、腺嘌呤环化酶
