老年人血清对人脐静脉内皮细胞功能的影响

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1、分类号：密级：UDG：学号：416527712053南昌大学专业学位研究生学位论文老年人血清对人脐静脉内皮细胞功能的影响EffectsOfSerumOnHumanUmbilicalVeinEndothelialCellsInAging徐江奇培养单位（院、系）：南昌大学第一临床学院指导教师姓名、职称：刘焕兵副教授主任医师余绍青副教授主任医师专业学位种类：临床医学专业领域名称：老年医学论文答辩日期：2015-06答辩委员会主席：黄起壬评阅人：邱元芝陈和平2015年5月学位论文独创性声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我

2、所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南昌大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名（手写）：徐江奇签字日期：2015年6月2日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南昌大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编本学位论文

3、。同时授权北京万方数据股份有限公司和中国学术期刊（光盘版）电子杂志社将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》和《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表，并通过网络向社会公众提供信息服务，同意按“章程”规定享受相关权益。学位论文作者签名（手写）：徐江奇导师签名（手写）：刘焕兵签字日期：2015年6月2日签字日期：2015年6月2日论文题目老年人血清对人脐静脉内皮细胞功能的影响姓名徐江奇学号416527712053论文级别博士□硕士√院/系/所南昌大学第一附属医院专业老年医学E_mail备注：√公开□保密（向校学位办申请获批准为“保密”，年月后公开）I摘要摘要目的：以人

4、脐静脉内皮细胞（HUVECs）为实验材料，以健康老年人及老年高血压患者血清作为损伤因素，建立反映健康老年人及老年高血压患者特点的内皮细胞损伤模型，采用MTT比色法检测不同处理组血清对血管内皮细胞增殖的的影响，通过测定各组内皮细胞中一氧化氮（NO）、内皮素-1（ET-1）、活性氧（ROS）的变化，探讨老年人血清对人脐静脉内皮细胞功能的影响。方法：取南昌大学第一附属医院妇产科新生儿脐带提取人脐静脉内皮细胞并鉴定，培养3-5代待用，收集健康青年人、正常老年人、老年高血压患者血清各20份，实验按空白对照组、正常青年组、正常老年组、老年高血压组分组，空白组只加培养基，不加血清，各组分别

5、与人脐静脉内皮细胞孵育，在不同时间段收集细胞上清液及细胞，采用MTT方法检测各组血清对内皮细胞增殖情况的影响，采用氧化还原方法检测各组细胞上清液NO含量，酶联免疫吸附实验检测ET-1含量，流式细胞仪检测各组细胞内ROS释放量，采用统计学方法处理数据结果，比较各组结果有无差别。结果：1.各组细胞在不同时间段细胞增殖活力也无统计学差异（P>0.05）。在同一时间点，健康青年组、健康老年组及老年高血压组细胞增殖活力在统计学上无显著差异（P>0.05），空白对照组与其他三组细胞增殖活力在统计学上均有显著差异（P<0.05）；2.各处理组血清与内皮细胞孵育12h、24h后，在同一时间点

6、，健康青年组、健康老年组、老年高血压组内皮细胞释放NO均呈梯度降低，差异具有统计学意义（P<0.01），各组内皮细胞培养24hNO释放量比12hNO释放量增加，但差异无统计学意义（P>0.05）；3.各实验组血清与内皮细胞孵育12h、24h后，在同一时间点，健康青年组、健康老年组、老年高血压组内皮细胞释放ET-1均呈梯度增高，差异具有统计学意义（P<0.01），各组内皮细胞培养24hET-1释放量比12hET-1释放量增加，差异具有统计学意义（P<0.01）；II摘要4.各实验组血清与内皮细胞孵育培养12h、24h后，在同一时间点，健康青年组、健康老年组、老年高血压组内皮细胞

7、内活性氧平均荧光强度呈升高趋势，健康老年组血清及老年高血压血清增加内皮细胞内ROS的产生。结论：健康老年人及老年高血压患者血清对人脐静脉内皮细胞功能具有损伤作用，可以减少血管内皮细胞分泌NO，促进ET-1合成及ROS生成，但对血管内皮细胞增殖情况影响不大。关键词：健康老年人；老年高血压患者；人脐静脉内皮细胞；一氧化氮；内皮素-1；活性氧IIIAbstractABSTRACTObjective：Thisstudyusedhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)a