大蒜新素对脑缺血再灌注大鼠海马保护作用

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1、中国药理学与毒理学杂志２００７年６月；２１（３）：１９７－２０１ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００７Ｊｕｎ；２１（３）：１９７－２０１·１９７·大蒜新素对脑缺血再灌注大鼠海马的保护作用２１１１１郭莉华，李清君，李文斌，胡玉燕，张敏（１．河北医科大学病理生理学教研室，河北石家庄０５００１７；２．邢台医学高等专科学校，河北邢台０５４０００）［３－５］［６］摘要：目的探讨大蒜新素对脑缺血再灌注海马组效。由于其具有脂溶性，易于通过血脑屏障，织的保护作用与钙转运的关系。方法采用４血管因此在脑血管疾病防治中的作用越来越受到重视。［７］闭塞法制备大鼠全脑缺血再灌注模型，大蒜新素

2、１０，史载祥等应用大蒜素注射液在临床上治疗急性－１２０和３０ｍｇ·ｋｇ分２次于缺血前３０ｍｉｎ和再灌注后脑梗死，发现其具有改善患者脑功能的功效。本研［８］１０ｍｉｎ经尾静脉注入，每次注射总量的１／２。再灌注究室任丽丽等的研究发现，大蒜新素具有抗氧化后２４ｈ取大鼠海马，甲苯胺蓝染色显微镜下观察海功能，可通过抗氧化途径抑制脑缺血再灌注（ｉｓｃｈｅ马组织学改变及存活神经元密度；定磷比色法测定ｍｉａｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ，ＩＲ）诱导的海马神经元凋亡。２＋Ｃａ转运ＡＴＰ酶活性；原子吸收法测定钙含量。结已有大量的研究证实，脑ＩＲ引起的细胞内钙果全脑缺血１０ｍｉｎ再灌注２４ｈ时，海马

3、ＣＡ１区形［９］超载是神经元损伤的另一重要机制。因此，本文２＋态学改变明显，神经元密度明显降低；海马组织Ｃａ在以往研究的基础上，观察了大蒜新素对脑ＩＲ后转运ＡＴＰ酶活性降低；组织钙含量显著增加。静脉大鼠海马形态及钙转运功能的影响，为临床应用大给予大蒜新素可使缺血再灌注海马组织形态学改变蒜新素防治缺血性脑损伤提供实验依据。２＋程度明显减轻，存活神经元密度增加，Ｃａ转运ＡＴＰ酶活性增加，组织钙含量降低。结论大蒜新素对全１材料和方法脑缺血再灌注后海马组织具有明显的保护作用；增加２＋Ｃａ转运ＡＴＰ酶活性、减少组织钙含量可能是其保１．１药品、试剂及仪器护作用的机制之一。大蒜素注射液

4、（有效成分为人工合成的大蒜新关键词：大蒜新素；脑缺血；再灌注损伤；海马；钙素，结构式为ＣＨ２＝ＣＨＣＨ２ＳＳＳＣＨ２ＣＨ＝ＣＨ２，２＋含量；Ｃａ转运ＡＴＰ酶２ｍＬ注射液中含三硫二丙烯３０ｍｇ，国药准字Ｈ３２０２５６３９，产品批号ＡＴ２０００６）购于济南利民制药中图分类号：Ｒ９７１２＋厂。Ｃａ转运ＡＴＰ酶试剂盒和考马斯亮蓝蛋白试文献标识码：Ａ剂盒均购于南京建成生物工程研究所。４１００型原文章编号：１０００３００２（２００７）０３０１９７０５子吸收分光光度仪为美国ＰＥ公司产品。１．２大鼠脑缺血再灌注模型的制备在我国，历代本草中都有关于大蒜作为药用的雄性Ｗｉｓｔ

5、ａｒ大鼠，体重２７０～３２０ｇ，由河北医科阐述。大蒜在遭受机械破坏时，立即释放出大蒜素［１０］大学实验动物中心提供。采用４血管闭塞法制（ａｌｌｉｃｉｎ），而大蒜素的化学性质很不稳定，很快转化备大鼠全脑ＩＲ模型。具体方法为，大鼠腹腔注射为大蒜新素（ａｌｌｉｔｒｉｄｉ），其化学名称为三硫二丙烯，－１１０％水合氯醛（３５０ｍｇ·ｋｇ）麻醉，枕后正中切口，目前临床所用大蒜素注射液的有效成分为大蒜新分离暴露第一颈椎横突，从翼状孔插入电烙针凝闭［１－２］素。采用现代化的研究方法已证实，大蒜新素双侧椎动脉，缝合切口，将大鼠放回笼内饲养。４８ｈ具有抗菌、杀虫、抗肿瘤和抗血小板积聚等多种功后，再

6、次１０％水合氯醛麻醉，颈部正中切口，游离双侧颈总动脉，用无创动脉夹夹闭双侧颈总动脉，１０收稿日期：２００６１１２０接受日期：２００７０３１９ｍｉｎ后移去动脉夹，恢复脑血流。假手术组凝闭双作者简介：郭莉华（１９７６－），女，河北省邢台人，硕士研究生。侧椎动脉并分离双侧颈总动脉，但不夹闭。夹闭双联系作者Ｅｍａｉｌ：ｑｉｎｇｊｕｎ６６６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎＴｅｌ：侧颈总动脉后大鼠出现昏迷，双侧瞳孔变大，对光反（０３１１）８６２６６４８７射消失，能自主呼吸的为模型复制成功。在整个实·１９８·ＣｈｉｎＪＰｈａｒｍａｃｏｌＴｏｘｉｃｏｌ２００７Ｊｕｎ；２１（３）验过程中出现

7、死亡、癫痫、抽搐或对光反射不消失的位用每克蛋白单位时间内催化ＡＴＰ所释放的无机－１－１大鼠均弃去不用。大鼠于再灌注２４ｈ时处死取脑。磷（Ｐｉ）量来表示，即（ｍｍｏｌＰｉ·ｈ·ｇ蛋白）。１．３实验分组及给药１．７数据处理及统计学检验大鼠７２只随机分为６组：正常对照组，假手术应用ＳＰＳＳ软件进行统计学分析。实验数据以－１组，ＩＲ组，ＩＲ＋大蒜新素１０，２０和３０ｍｇ·ｋｇ组。ｘ珋±ｓ表示，采用单因素方差分析进行多组间比较，ｔ－１将总量为１０，２０和３０ｍｇ·ｋｇ的大蒜新素注射液分