脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

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1、脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用【摘要】目的观察脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法凝闭大鼠双侧椎动脉4～5h后，夹闭颈总动脉30min，再灌注90min，造成大鼠脑缺血再灌注损伤模型，观察脑伤宁对脑组织中生化指标及脑电图的影响。结果缺血再灌注造成脑组织严重损伤，脑组织中水、Na+、Ca2+含量及丙二醛(MDA)含量较对照组明显增高，而超氧化物歧化酶(SOD)活力较对照组降低，并伴有脑电图异常和脑组织结构病理性改变。夹闭颈总动脉前30min腹腔注射脑伤宁能降低脑组织中水、Na+、Ca

2、2+含量及MDA含量，并提高SOD活力，对组织学检查及脑电图也有所改善。结论脑伤宁对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。【关键词】脑伤宁；脑缺血；再灌注损伤；Ca2+超载　　Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectsofNaoshangningrecipeonbraininjuryinrats.MethodsThebilateralvertebralarteriesofratsinfolloin.TheeffectsofNaoshangningrecipeo

3、nthecontentsofalondialdehyde(MDA)contentandsuperoxidedismutase(SOD)activityinbrainhemispheres,asinischemiaand90minafterreperfusion,thecontentsofalEEGactivityandischemicinjuryinthebraintissues.Naoshangningrecipedecreasedtheelevatedicinjuryofbraintissue,

4、andpromotedtherecoveryofEEGactivities.ConclusionNaoshangninghasprotectiveeffectsoncerebralischemia-reperfusioninjuryinrats.　　Keyia;reperfusioninjury;Ca2+overloading　　脑伤宁是武汉大学人民医院神经科王安国教授之经验方，由川芎、当归、白芍、琥珀、钩藤、远志、茯苓、夜交藤等中药组成，具有活血化瘀、宁心安神、平肝熄风、健脾除湿之功效。早期药理学

5、研究〔1〕表明脑伤宁可使高血黏模型大鼠的全血黏度、血浆黏度及红细胞压积明显降低，为其临床应用提供初步理论依据，本实验进一步研究脑伤宁对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用，并探讨其作用机制。　　1材料和仪器　　1.1药材　　实验所需中药材均购自湖北省中药材公司,由武汉大学人民医院药学部质检科鉴定。　　1.2药物与试剂　　丁咯地尔注射液，批号01754，法国施维雅药厂生产。超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，批号20031004；丙二醛(MDA)试剂盒，批号20030811，均购自南京建成生物制剂研究所。　

6、　1.3动物　　-6200型多道生理记录仪（日本岛津公司）。　　2实验方法　　2.1脑伤宁汤剂的制备　　参照文献〔1〕的方法制备。　　2.2模型的建立与给药　　大鼠50只，随机分为5组，每组10只：即假手术（sham）组及单纯缺血再灌注(IR)组，脑伤宁2个剂量组及丁咯地尔组。四血管结扎全脑缺血模型的制备　　2.3检测指标　　再灌注结束时迅速断头取出脑组织，去脑干和小脑，将脑组织划“+”分为4个部分，3份立即低温(-20℃)保存用于MDA含量、SOD活性和病理组织学检查，1份用于测定脑组织水、Na+

7、、Ca2+含量。其中脑水分用干湿重法，Na+、Ca2+含量用火焰原子吸收分光光度法〔3〕,邻苯三酚改良法〔4〕测定SOD活性，硫代巴比妥酸法〔5〕测定MDA含量。　　2.4统计学处理　　实验数据以±s表示，对EEG的影响采用Ridit分析，其它采用组间t检验进行统计学分析，P0.05为差异有显著性。　　3结果　　3.1对脑缺血再灌注动物死亡率及EEG的影响　　在整个缺血及再灌注期间，IR组、脑伤宁25mg·kg-1组及丁咯地尔组分别有3、1、1只动物因缺血损伤引起动物死亡。四血管结扎后大鼠EEG电压

8、波幅变小，脑电很快抑制变平，按EEG变化程度分为5级〔6〕，即达到缺血前波幅100%属1级，75%以上为2级，75%～25%为3级，25%以下为4级，几乎呈等电位的为5级。sham组在整个缺血及再灌注期间，EEG变化均以Ⅰ级为主。而缺血再灌注组缺血期EEG变化Ⅳ级有3只，Ⅴ级有3只；再灌注期EEG变化Ⅳ级有2只，Ⅴ级有4只，经Ridit分析，与sham组比较差异显著，P0.05。脑伤宁组EEG改变以Ⅲ级及Ⅳ级为主，经Ridit分析，与IR组比较差异显著，P0.05或P