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时间:2018-11-11
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1、脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用【摘要】目的观察脑伤宁对大鼠脑缺血再灌注脑损伤的保护作用。方法凝闭大鼠双侧椎动脉4~5h后,夹闭颈总动脉30min,再灌注90min,造成大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察脑伤宁对脑组织中生化指标及脑电图的影响。结果缺血再灌注造成脑组织严重损伤,脑组织中水、Na+、Ca2+含量及丙二醛(MDA)含量较对照组明显增高,而超氧化物歧化酶(SOD)活力较对照组降低,并伴有脑电图异常和脑组织结构病理性改变。夹闭颈总动脉前30min腹腔注射脑伤宁能降低脑组织中水、Na+、Ca2
2、+含量及MDA含量,并提高SOD活力,对组织学检查及脑电图也有所改善。结论脑伤宁对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。【关键词】脑伤宁;脑缺血;再灌注损伤;Ca2+超载 Abstract:ObjectiveTostudytheprotectiveeffectsofNaoshangningrecipeonbraininjuryinrats.MethodsThebilateralvertebralarteriesofratsinfolloin.TheeffectsofNaoshangningrecipeont
3、hecontentsofalondialdehyde(MDA)contentandsuperoxidedismutase(SOD)activityinbrainhemispheres,asinischemiaand90minafterreperfusion,thecontentsofalEEGactivityandischemicinjuryinthebraintissues.Naoshangningrecipedecreasedtheelevatedicinjuryofbraintissue,and
4、promotedtherecoveryofEEGactivities.ConclusionNaoshangninghasprotectiveeffectsoncerebralischemia-reperfusioninjuryinrats. Keyia;reperfusioninjury;Ca2+overloading 脑伤宁是武汉大学人民医院神经科王安国教授之经验方,由川芎、当归、白芍、琥珀、钩藤、远志、茯苓、夜交藤等中药组成,具有活血化瘀、宁心安神、平肝熄风、健脾除湿之功效。早期药理学研究[1
5、]表明脑伤宁可使高血黏模型大鼠的全血黏度、血浆黏度及红细胞压积明显降低,为其临床应用提供初步理论依据,本实验进一步研究脑伤宁对急性脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用,并探讨其作用机制。 1材料和仪器 1.1药材 实验所需中药材均购自湖北省中药材公司,由武汉大学人民医院药学部质检科鉴定。 1.2药物与试剂 丁咯地尔注射液,批号01754,法国施维雅药厂生产。超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒,批号20031004;丙二醛(MDA)试剂盒,批号20030811,均购自南京建成生物制剂研究所。 1.3动
6、物 -6200型多道生理记录仪(日本岛津公司)。 2实验方法 2.1脑伤宁汤剂的制备 参照 2.3检测指标 再灌注结束时迅速断头取出脑组织,去脑干和小脑,将脑组织划“+”分为4个部分,3份立即低温(-20℃)保存用于MDA含量、SOD活性和病理组织学检查,1份用于测定脑组织水、Na+、Ca2+含量。其中脑水分用干湿重法,Na+、Ca2+含量用火焰原子吸收分光光度法[3],邻苯三酚改良法[4]测定SOD活性,硫代巴比妥酸法[5]测定MDA含量。 2.4统计学处理 实验数据以±s表示,对E
7、EG的影响采用Ridit分析,其它采用组间t检验进行统计学分析,P<0.05为差异有显著性。 3结果 3.1对脑缺血再灌注动物死亡率及EEG的影响 在整个缺血及再灌注期间,IR组、脑伤宁25mg·kg-1组及丁咯地尔组分别有3、1、1只动物因缺血损伤引起动物死亡。四血管结扎后大鼠EEG电压波幅变小,脑电很快抑制变平,按EEG变化程度分为5级[6],即达到缺血前波幅100%属1级,75%以上为2级,75%~25%为3级,25%以下为4级,几乎呈等电位的为5级。sham组在整个缺血及再灌注期间
8、,EEG变化均以Ⅰ级为主。而缺血再灌注组缺血期EEG变化Ⅳ级有3只,Ⅴ级有3只;再灌注期EEG变化Ⅳ级有2只,Ⅴ级有4只,经Ridit分析,与sham组比较差异显著,P<0.05。脑伤宁组EEG改变以Ⅲ级及Ⅳ级为主,经Ridit分析,与IR组比较差异显著,P<0.05或P<0.01,说明脑伤宁可显著改善EEG的恢复程度(见表1)。 表1对大鼠脑缺血再灌注后EEG幅度变化的影响(略) Tab.1EffectonEEGinratsind
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