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时间:2018-11-15
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1、脑益康对AD大鼠脑组织炎症损伤的保护作用作者:路燕周爱玲周静施海燕【摘要】 目的探讨脑益康对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习、记忆能力和脑内炎性反应的影响。方法采用β淀粉样蛋白1~40(Aβ1~40)右侧海马注射制备AD模型大鼠,脑益康灌胃给药28d后,采用Y型迷宫刺激器检测大鼠学习、记忆能力,免疫组织化学方法检测大鼠海马肿瘤坏死因子α(TNFα)和白细胞介素6(IL6)的表达情况,酶联免疫吸附法(ELISA)检测皮层白细胞介素1β(IL1β)、转化生长因子β1(TGFβ1)的蛋白水平。结果脑益康能改善模
2、型大鼠学习记忆能力,显著降低AD大鼠脑组织的IL1β、IL6、TNFα的含量(P<0.01),增加TGFβ1的表达(P<0.01)。结论脑益康对AD模型大鼠学习记忆能力有改善作用,通过降低AD大鼠脑组织的IL1β、IL6、TNFα的含量,增加TGFβ1的表达,有效抑制海马神经元炎性反应。【关键词】阿尔茨海默病;脑益康;β淀粉样蛋白;炎性反应【Abstract】ObjectiveToinvestigateeffectsofNaoyikangonimprovinglearningandmemoryabilitya
3、ndinflammationreactionofAlzhEimers′disease(AD)modelrats.MethodsADmodelratspus.Afterintragastricallyadministratedemoryabilitiesofratsaze.ThelevelsofTNFαandIL6inADrats′hippocampusmunohistochemistry.ThelevelsofIL1β、TGFβ1incortexeasuredbyELISA.ResultsNaoyikangcouldi
4、mprovethelearningandmemoryabilitiesofADrats,descendsignificantlytheconcentrationofIL1β、IL6andTNFα(P<0.01),andincreasetheexpressionofTGFβ1(P<0.01).ConclusionsNaoyikangcanimprovethelearningandmemoryabilitiesofADrats,andeffectivelycontroltheinflammationreactionbyde
5、creasingthecontentofIL1β,IL6andTNFαandincreasingtheexpressionofTGFβ1.【Keyer′sdisease;Naoyikang;βAmyloid;InflammationReaction 目前认为β淀粉样蛋白(Aβ)沉积导致的炎症反应是阿尔茨海默病(AD)核心病理机制〔1,2〕。AD病因至今仍未明确,有证据显示AD是一种由多原因引起、涉及多种病理机制和出现多种病理表现的“多因异质性疾病”〔3〕。生化合成药物治疗存在疗效不理想、毒副作用大、价格较昂贵等多
6、方面的问题。本研究观察脑益康对AD大鼠学习、记忆能力和脑内炎性反应的影响。 1材料与方法 1.1动物 雄性SD大鼠,SPF级,体重(220±10)g,由南通大学实验动物中心提供,许可证号:SYXK(苏)20020022。标准鼠饲料常规喂养。 1.2试剂与仪器 脑益康(南通市中医院制剂室制成颗粒剂,每克颗粒含生药1.98g);脑复康(吡拉西坦片,南京白敬宇制药厂生产,批号:20050812);羧甲基纤维素钠(分析纯,上海化学试剂站分装厂);Aβ1~40(Sigma公司,编号:A1075);肿瘤坏死因子α(TNFα)
7、、白介素6(IL6)、兔抗大鼠多抗(武汉博士德生物工程有限公司,编号:BA0131;武汉博士编号:BA0990);兔免疫组化试剂盒(北京中杉金桥生物技术公司,编号:SP9001);大鼠白介素β(IL1β)、转化生长因子β1(TGFβ1)ELISA试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司,编号:EK0393/0514)。大鼠脑立体定位仪(美国Stoelting公司);Y型(MGB型)迷宫刺激器(张家港市三兴教学机械厂);冰冻切片机(LAICACM1900,德国);光学显微镜,日本OLYMPUS公司;ELx800全
8、自动酶标仪(美国宝特仪器有限公司)。 1.3方法 1.3.1分组、造模与给药 用电迷宫刺激器筛选出学习记忆能力正常的SD大鼠48只,随机分为6组:假手术组、模型组、脑复康对照组、脑益康低、中、高剂量组;其中,脑益康中剂量相当于临床用量;每组8只。将大鼠用10%水合氯醛(
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