脑神康胶囊对培养大鼠海马神经元缺氧复氧损伤的保护作用论文

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1、脑神康胶囊对培养大鼠海马神经元缺氧复氧损伤的保护作用论文李伟刘德山常萍林炜炜【摘要】目的观察益气补肾中药脑神康胶囊对体外培养大鼠海马神经元缺氧复氧损伤的保护作用。方法原代培养大鼠海马神经元,随机分为对照组，损伤组，脑神康胶囊高、中、低浓度组。对照组正常培养，损伤组及脑神康胶囊各浓度组建立缺氧复氧损伤模型，其中脑神康胶囊各浓度组于复氧时换以不同浓度(5%、10%、20%)含药血清的培养液，检测各组细胞超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)活力及丙二醛(MDA)含量，测定细胞存活率及凋亡率，RTPCR法检测bcl2mRNA和baxmRNA的表达及两者比值。结果与对照组比较.fr

2、eelRNA表达下降，baxmRNA表达升高，bcl2/bax降低(均P0.01);脑神康胶囊各浓度组均较损伤组SOD活性及细胞存活率均升高(P0.01)，MDA含量及细胞凋亡率均降低(P0.01)，LDH活力及baxmRNA表达降低(P0.01，P0.05),bcl2mRNA表达升高，bcl2/bax增加(均P0.01)，且呈明显的剂量依赖性。结论脑神康胶囊对海马神经元缺氧复氧损伤有明显的保护作用,其作用机制可能与其提高神经元抗氧化能力、调节凋亡相关蛋白、减少凋亡密切相关。【关键词】海马神经元;缺氧复氧损伤;脑神康胶囊;抗氧化;凋亡【Abstract】ObjectiveToex

3、ploretheprotectiveeffectsofNaoshenkangtraditionalChinesemedicineechanisms.MethodsTheprimarilyculturedneonaterathippocampalneuronslydividedintonormal,anoxiareoxygenationandlarge,middle,andsmalldosageofChineseMedicineprotectivegroups.TheChineseMedicineprotectivegroupsbeforereoxygenation.Themet

4、abolicrateofMTT,thecontentofmalondialdehyde(MDA)andtheactivitiesofsuperoxidedismutase(SOD),lactatedehydrogenase(LDH)easuredbyassaykits.Theapoptosisratesofhippocampalneuronsetry.RTPCRRNAexpressionsofbcl2andbaxgenes.ResultsTheactivityofSOD,survivalrateofcell,theratioofbcl2/baxandtheexpressionof

5、bcl2mRNAinanoxiareoxygenationgroupRNAalgroup.TheactivityofSOD,.freelRNAandtheratioofbcl2/baxinallChineseMedicineprotectivegroupsRNAonstratedobviousdosageeffectrelationship.ConclusionsNaoshenkangcapsulehasaprotectiveeffectonhippocampalneuronsagainstanoxiareoxygenationinjury,anditsmechanismm

6、aybethattheChineseMedicinecanincreasetheantioxidativeactivitiesofneurons,regulateassociatedproteinofapoptosisandinhibittheapoptosis.【Keypalneurons;Anoxiareoxygenation;Naoshenkangcapsule;Oxygenfreeradical;Apoptosis氧自由基学说在缺血性脑损伤的机制中占有重要地位，缺血时自由基大量堆积对脑组织产生毒性作用，造成组织器官的结构损伤和功能障碍，导致神经元坏死和凋亡〔1〕。有关凋亡机制

7、及抗凋亡药物的中西药开发，一直是国内外研究的热点课题。近年来，临床及动物实验采用益气补肾中药治疗脑缺血性疾病，取得了较好的疗效〔2，3〕，但体外实验未见报道。本研究旨在体外建立胚胎大鼠海马神经元的缺氧复氧损伤模型，观察益气补肾中药方——脑神康胶囊对其神经元的抗氧化及抗凋亡作用。1材料与方法1.1动物成年雄性TT均为Sigma公司产品，DMEM/F12培养基由Gibco公司生产，胎牛血清由杭州四季青生物工程公司生产，其余为国产分析纯。超氧化物歧化