高糖环境对乏氧损伤大鼠海马神经元凋亡的影响及脑神康胶囊的干预作用

《高糖环境对乏氧损伤大鼠海马神经元凋亡的影响及脑神康胶囊的干预作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、高糖环境对乏氧损伤大鼠海马神经元凋亡的影响及脑神康胶囊的干预作用作者：林炜炜刘德山李伟常萍【摘要】　　目的研究高糖环境对体外培养的大鼠海马神经元乏氧损伤时凋亡的影响以及脑神康胶囊对损伤神经元的保护作用。方法原代培养大鼠海马神经元，将细胞随机分成8组：对照组、高糖组、黄嘌呤（X）/黄嘌呤氧化酶（XO)组、川芎嗪组、生理盐水组、脑神康低、中、高剂量组。干预后测细胞存活率及凋亡率，采用RealtimePCR法检测各组海马神经元HIF1αmRNA、Bcl2mRNA和BaxmRNA的表达及Bc2/Bax比值。结果与对照组相比，高糖组及X/XO组神经元存活率、Bcl2mRN

2、A表达水平和Bcl2/Bax的水平均显著下降，神经元凋亡率、HIF1αmRNA和BaxmRNA表达水平均显著升高(均P<0.01)；与X/XO组比较，川芎嗪组及脑神康各浓度组神经元存活率、Bcl2mRNA表达和Bcl2/Bax的水平均明显上升，而神经元凋亡率、HIF1αmRNA和BaxmRNA表达均明显下降。结论脑神康胶囊能够明显抑制高糖环境下大鼠海马神经元的凋亡，对高糖环境下海马神经元的乏氧损伤有保护作用，其作用机制之一是下调HIF1αmRNA表达、上调Bcl2mRNA表达、改善乏氧环境及抗细胞凋亡。【关键词】海马神经元；高糖；凋亡；黄嘌呤/黄嘌呤氧

3、化酶；脑神康胶囊【Abstract】ObjectiveToresearchtheeffectofNaoshenkangcapsuleonexpressionofhypoxiainduciblefactor1alpha(HIF1α)ofoxidativedamagedrathippocampalneuronsinhighglucose.MethodsTheprimarilyculturedneonaterathippocampalneuronslydividedintoEightgroups:control,highglucose,xanthine/xanthineo

4、xidase(x/xo),ligustrazine,normalsodiumandthesmall,middle,andlargedosageofNaoshenkanggroups.Therateofcellsurvivalandapoptosiseasured,andthemethodofrealtimePCRRNAexpressionofHIF1α,Bcl2,Bax.ResultsThesurvivalrate,theexpressionofBcl2mRNAandtheratiosofBcl2andBaxinthehighglucosegroupRNAhig

5、herthanthoseofx/xogroup(P＜0.01).Thesurvivalrate,theexpressionofBcl2mRNAandtheratiosofBcl2andBaxintheligustrazinegroupandallNaoshenkanggroupsRNAlopalneuronsinthehighglucose,andmakeaprotectiveeffectonhypoxiainjury.ItsmechanismmaybethatNaoshenkangcapsulecandoRNAexpression,upregulateBcl2m

6、RNAexpression,improvethehypoxiaandresistapoptosis.【Keypalneurons;Highglucose;Apoptosis;Xanthine/xanthineoxidase;Naoshenkangcapsule　　高血糖可引起神经传导速率下降和神经纤维变性，其神经系统的损害除表现在周围神经和自主神经系统外，亦可累及中枢神经系统〔1〕，出现糖尿病脑功能损害〔2〕，这主要是由于高糖所引发的神经细胞的凋亡所致。目前已有较多　　1.2.4MTT法测定细胞代谢率　　将细胞以1×105/孔接种于96孔板，每孔加入10μlMTT(终浓度

7、为0.5g/L)，对照孔不作处理，4h后，终止培养，吸去上清，每孔加入100μl二甲基亚砜，平行振荡10min，用酶标仪在490nm处测定OD值。神经元存活率=试验组OD值/对照组OD值×100%。　　1.2.5流式Annexin/PI双染法测细胞凋亡率　　参照试剂盒操作说明，以0.25%胰酶消化细胞，用PBS洗涤细胞2次，2000r/min离心5min，收集1×105个细胞，使用500μlBindingBuffer悬浮细胞，加入5μlAnnexinVFITC及5μlPI，混匀，室温避光反应15min，1h之内流式细胞仪检测