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1、谈奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞保护作用 [论文关键词]奥扎格雷钠 脑缺血/再灌注 IL-6 TNF-α [论文摘要]目的观察奥扎格雷钠对大鼠脑缺血/再灌注后IL-6和TNF-α蛋白表达的影响并探讨其作用机制。方法将30只SD雄性大鼠随机分为正常组、缺血/再灌组和奥扎格雷钠组。采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)法制备局灶性脑缺血/再灌注模型,应用免疫组化法分别检测各组大鼠脑组织IL-6和TNF-α蛋白表达。结果与正常组比，脑缺血/再灌注组IL-6和TNF-α蛋白的表达明显增多(P<0.0
2、5)；奥扎格雷钠能明显减少TNF-α的表达(P<0.05)，而对IL-6表达无影响(P>0.05)。结论:奥扎格雷钠对大鼠脑缺血/再灌注具有保护作用，其机制可能与抑制TNF-α表达有关。 [Keyornecroticfactoralpha(TNF-α),ischemia-reperfusion;Ozagrelsodium [Abstract]ObjectiveObservetheeffectofOzagrelsodiumonlevelsofIL-2andTNF-ainratsia-repe
3、rfusioninjury,andstudythemechanismsofprotectiveeffectsofOzagrelsodiumagainstfocalcerebralischemia-reperfusioninjuryinrats.Methodsratslydividedintothreegroups.normalgroup,ischemia-reperfusiongroupandOzagrelsodiumgroup,Ozagrelsodiuminbeforeischemia.Theright
4、middlecerebralarteryoftheratia-reperfusiongroupparedalgroup;CAO)法制备动物模型[2]：用6%水合氯醛(0.4～0.5ml/100g)腹膜腔内注射麻醉,颈部正中切口,暴露颈总动脉在其深面穿一细线,钝性分离颈内、外动脉。在颈外动脉上剪一小口，用制备的插线(在插线20mm处做一标记)插入颈外动脉至颈总动脉,将颈外动脉拉向下方,使其与颈内动脉成直线,将插线经颈总动脉分叉处插入颈内动脉。插线入颅后,一方面注意插入长度,另一方面应注意手感,当遇到阻力时应
5、立即停止,以免用力过大插破血管。然后收紧颈外动脉根部线的活结,松开颈总动脉夹,观察有无出血,抽出颈总动脉深面的细线。连续缝合手术切口,注意动物保暖,待其清醒后观察其行为和症状。栓塞2小时后进行再灌注，再灌注时间为12小时。 1.3海马区脑组织检测 HE染色观察组织坏死情况。免疫组织化学染色检测组织IL-6和TNF-α蛋白含量变化。光学显微镜下，采用BI-2000医学图像分析系统对免疫组织化学切片结果进行观测，对于IL-6免疫阳性细胞和TNF-α免疫阳性细胞的形态学观测时以400倍光镜下所见形态为准；而
6、对于免疫阳性细胞数量的统计，采用400倍光镜下每张切片选取5个最高密度区，对免疫阳性细胞的数目进行计数。采用SPSS10.0进行统计学分析，在进行多组间比较时采用q检验，两组比较时才用t检验，检验水准α=0.05 2.结果： 2.1HE染色结果 光学显微镜观察可见，1.正常组海马区神经胶质细胞及毛细血管形态正常，结构完整，核仁清晰，胞浆无红染。海马区锥体细胞排列整齐，高倍镜下可见锥体细胞核大而圆、核仁明显（图1）。2.脑缺血再灌注组海马区神经胶质水肿加重，海马锥体细胞排列散乱，胶质细胞稀疏变性，海马
7、区锥体细胞出现异常变化，细胞体积缩小，核不规则，大量变性，变性的锥体细胞核固缩深染，胞浆嗜伊红（图2）。3.治疗组海马区锥体细胞层结构基本正，但神经元周围间隙扩大、胶质轻度水肿，可见血管周围炎性细胞浸润（图3） 图1正常组海马区组织400×图2模型组海马区组织400×图3治疗组海马区组织400× 2.2海马区IL-6和TNF-α免疫组织化学观测结果免疫组织化学染色（见图4-9）实验结果经统计学分析处理显示，正常组海马区IL-6免疫阳性细胞有少量表达，主要分布于皮质内，而髓质内少见或未见。模型组IL-6
8、免疫阳性细胞表达数量明显增多，在脑组织缺血损伤和坏死区呈密集分布，向周围逐渐减少，髓质表达相对增多,与正常组差异性显著（P<0.05）。给与奥扎格雷钠治疗后IL-6的表达变化不明显，与模型组之间无统计学差异（P>0.05）（见表1）；同时检测到正常组大鼠海马区TNF-α免疫阳性细胞有少量表达，而模型组大鼠海马区TNF-α免疫阳性细胞表达数明显增多，与正常组之间有显著性差异（P<0.05）。经过奥扎格雷钠治疗后
