奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞保护作用的研究论文

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1、奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞保护作用的研究论文马瑛靳学婷方艳秋谭岩【摘要】目的观察奥扎格雷钠对大鼠脑缺血/再灌注后IL6和TNFα蛋白表达的影响，探讨奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑海马区细胞的保护作用及其作用机制。方法将40只SD雄性大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、生理盐水对照组和奥扎格雷钠治疗组。采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)法制备局灶性脑缺血/再灌注模型，应用免疫组化技术分别检测各组大鼠脑组织IL6和TNFα蛋白表达情况。结果与假手术组相比较，脑缺血/再灌注组IL6和TNFα蛋白的表达明显增多(P0.05)，奥扎格雷钠能够明显减少TNFα的表达(P

2、0.05)，而对IL6表达无影响(P0.05)。结论奥扎格雷钠对大鼠脑缺血/再灌注具有保护作用，其机制可能与抑制TNFα表达有关。【关键词】奥扎格雷钠;脑缺血/再灌注;白细胞介素6;肿瘤坏死因子α【Abstract】ObjectiveToobservetheeffectofozagrelsodiumonthelevelsofIL2andTNFαinratsiareperfusioninjury，andstudythemechanismsofprotectiveeffectsofOzagrelsodiumagainstfocalcerebralischemiareperfu

3、sioninjuryinrats.MethodsTheratslydividedintosham.freeliareperfusion，salineandozagrelsodiumgroups.Therightmiddlecerebralarteryoftheratsmunohistochemicaltechniquesiareperfusiongroupparedgroup.parediareperfusiongroup，ozagrelsodiumsignificantlyreducedthelevelofTNFα(P0.05),andhadnoeffectonIL6ex

4、pression(P0.05).ConclusionsOzagrelsodiumcanreduceischemiareperfusioninjurybydecreasingthedamagetotheTNFα.【Key;Ischemiareperfusion;IL6;TNFα奥扎格雷钠(Ozagrelsodium)是目前广泛应用于临床治疗脑血管病(CVD)的药物之一〔1〕，但其具体作用机制报道很少。IL6和TNFα在脑组织损伤和修复过程中起着重要的作用，奥扎格雷钠是否通过影响IL6和TNFα的表达实现作用，尚未见到实验研究报道。本实验观察奥扎格雷钠对缺血再灌注大鼠脑

5、海马区细胞的保护作用，并对其作用机制进行探讨，为其治疗脑血管病提供更深层次理论依据。1材料与方法1.1动物健康成年SD雄性大鼠40只，购自天津中医药大学实验动物养殖中心，体重300～350g。将SD大鼠随机分成假手术对照组、缺血/再灌注组、奥扎格雷钠治疗组、生理盐水对照组，每组10只，其中奥扎格雷钠治疗组在再灌注前30min舌静脉注射奥扎格雷钠8mg/kg，生理盐水对照组注射等量生理盐水。1.2缺血/再灌注大鼠模型的制备〔2〕采用大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)法：用6%水合氯醛(0.4～0.5ml/100g)腹膜腔内注射麻醉，颈部正中切口，暴露颈总动脉在其深面穿一细线，钝性分离颈内、

6、外动脉。在颈外动脉上剪一小口，用制备的插线(在插线20mm处做一标记)插入颈外动脉至颈总动脉，将颈外动脉拉向下方，使其与颈内动脉成直线，将插线经颈总动脉分叉处插入颈内动脉。插线入颅后，一方面注意插入长度，另一方面应注意手感，当遇到阻力时应立即停止，以免用力过大插破血管。然后收紧颈外动脉根部线的活结，松开颈总动脉夹，观察有无出血，抽出颈总动脉深面的细线。连续缝合手术切口，注意动物保暖，待其清醒后观察其行为和症状。栓塞2h后进行再灌注，再灌注时间为12h。假手术组仅分离双侧颈总动脉，但不阻断血流。1.3海马区脑组织检测应用HE染色观察组织坏死情况，应用免疫组织化学方法检测组织IL6和T

7、NFα蛋白含量变化。光学显微镜下，采用BI2000医学图像分析系统对免疫组织化学切片结果进行观测，对于IL6免疫阳性细胞和TNFα免疫阳性细胞的形态学观测时以100倍光镜下所见形态为准;免疫阳性细胞数量的统计，采用400倍光镜下每张切片选取5个最高密度区，对免疫阳性细胞的数目进行计数。1.4统计学分析采用SPSS10.0进行统计学分析，在进行多组间比较时采用q检验，两组比较时用t检验。2结果2.1海马区HE染色结果假手术组海马区神经胶质细胞及毛细血