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时间:2019-05-21
《sRNAsraB调控肠炎型沙门菌的抗蛋清抑菌作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、毕业论文题目:!墨盟垒(曼!垒堕翅蕉盟塞型逆[]菌丝垫堡溘扭董笠旦专业丛生塑鱼生垡垫堂盟级硕士生姓名:整皇遗指导教师(姓名、职称):室4查夏(塾撞)!鲎銎(塾撞!摘要目的肠炎型沙门菌(SalmonellaentericaserovarEnteritidis,S.Enteritidis)是唯一可在蛋清中生存的沙门菌血清型,其在禽蛋中生存能力对其传播感染起重要作用,使肠炎沙门菌成为引起人类沙门菌病的主要病原。肠炎沙门菌与其他血清型并无太多基因组上的差异,其在蛋清中生存的特性至今尚未弄清可能与其基因表达调控的不
2、同所至。sRNA(smallnoncodingRNA)是近年发现的新的基因表达调控因子,在转录后水平调控基因表达,在生物体的应急、适应性方面起重要作用。本课题研究了沙门菌功能sRNASraB与蛋清及蛋清中各种抑菌因子的关系,以寻找肠炎型沙门菌在蛋清中生存的机理。方法本课题运用Red重组系统(redrecombinationsystem)敲除肠炎沙门菌SE2472的SraB基因,构建sRNASraB敲除株(SE2472ASraB);并构建可在正常培养条件下低转录sRNASraB的回复质粒pHDB3.SraB
3、,以回复SE2472△SraB表型的缺陷。课题研究了SraB敲除株(SE2472△SraB)和野生型SE2472对抗蛋清抑菌能力的差异,及蛋清中抑菌因子溶菌酶和转铁蛋白对SraB缺陷株的影响,并运用回复质粒验证实验结果。结果实验成功构建了SE2472ASraB及回复质粒pHDB3.SraB。研究发现,敲除株在蛋清存活率为野生型的61.70%,回复株的存活率比敲除株提高25%;在转铁蛋白抑菌实验中,孵育8h和24h,敲除株的存活率分别为野生型存活率的38%和23%,孵育8h后回复株的存活率比敲除株提高15%
4、,24h回复株的存活率有所下降;在溶菌酶抑菌实验中,孵育8h和24h后,敲除株的存活率分别野生型存活率的41%矛I27%,回复株的存活率分别比敲除株提高35%矛N23%。结论肠炎型沙门菌sRNASraB与其在禽蛋中的存活有关,可通过调节细菌抵抗蛋清中溶菌酶抗菌作用,增加肠炎型沙门菌在蛋清中的存活几率。关键词肠炎型沙门菌sRNA毒力控制蛋清IIllllllllIIIllUlllllY2377782THESIS:AnalysistheregulationroleofsRNA(sraB)duringthesur
5、vivalofSalmonellaEnteritidisineggalbumenSPECIALIZATION:BacterialandBiopharmaceuticalPOSTGRADUATE:Hui—yuanJiangMENTOR:Fen.yongLiu(professor),KeZen(professor)Abstract[Objective]:Salmonellaspp.areimportantfood—bornepathogensofhumanandanimal.s.entericaserovar
6、Enteritidisistheonlyserovarthatroutinelycauseshumaninfectionthroughintactegg,themolecularbasisofitsabilitytosurviveineggispoorlyunderstood.Theimportanceofpost—transcriptionalregulmionbysmallnon.codingRNAs(sRNA)hasrecentlybeenrecognized.ThesRNAsplaydiverse
7、physiologicalrolesinstressresponses,regulationofmetabolism,controlofbacterialenvelopecompositionandbacterialvirulence.Inthisstudy,westudiedregulatoryfunctionofsalmonellasRNAsraBassociatedwithsurvivalabilityofS.entericaserovarEnteritidisineggalbumen.[Metho
8、d]:TostudythecontributionofsraBtothesurvivalabilityofS.Enteritidisineggalbumen,WeconstructthesraBdeletionmutantofSE2472(SE2472AsraB)usingredrecombinationsystem.Thenweconstructcomplementplasmidbyclonedthewild.typeall
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