甘蓝中硫代葡萄糖苷的含量及葡萄硫苷酶性质研究

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1、浙江工商大学硕士学位论文甘蓝中硫代葡萄糖苷的含量及葡萄硫苷酶性质研究姓名：修丽丽申请学位级别：硕士专业：农产品加工与贮藏工程指导教师：沈莲清;王向阳20050101甘蓝中硫代葡萄糖苷的含量及葡糖硫苷酶性质研究摘要十字花科植物中含有硫代葡萄糖苷，硫代葡萄糖苷的基本结构为～‘个B-D一葡萄糖连接一个磺酸盐醛肟基团和一个来源于氨基酸的侧链。硫代葡萄糖苷是抗癌活性成分的前体。十字花科植物抗癌活性的大小取决于硫代葡萄糖苷的含量、种类及葡糖硫苷酶的活性。对甘蓝、西兰花、花椰菜四种十字花科蔬菜中烯丙基硫代葡萄糖苷含量情况进行测定，发现离子对高效液相

2、色谱法适合用于这些植物的测定，流动相选择100％的5mM四甲基溴化铵溶液分离效果较好。甘蓝中含有具有抗癌活性的烯丙基硫代葡萄糖苷，其含量为0．08～O．18mg／g鲜重。甘蓝在贮藏过程中烯丙基硫代葡萄苷的含量会下降，温室(24。C)贮藏5天会下降60％以上。研究发现，低温贮藏、膜包装及气调可以减少甘蓝在贮藏过程中烯丙基硫代葡萄糖苷的损失，贮藏5天损失率分别减小到34％，44％，23％。植物中存在硫代葡萄糖苷一葡糖硫苷酶体系。在一定条件下，葡糖硫苷酶可以将硫代葡萄糖苷分解产生异硫代氰酸盐等抗癌活性成分。本文对甘蓝中葡糖硫苷酶的分离纯化方

3、法及性质进行了研究。研究结果表明：经硫酸铵沉淀，DEAE一纤维素一52柱层析及SephadexG-200柱层析，葡糖硫苷酶的纯化倍数分别为酶粗提液的2倍，25倍，103倍：产率分别为68％，51％，35％；SDS-PAGE测得甘蓝中葡糖硫苷T酶的亚基分子量为71．4kDa，62．7kDa，27．9kDa，25．3kDa；以磷酸盐做缓冲液，甘蓝中葡糖硫菅酶最适pH值在5．5～6．5之间；最适温度在30。C～40。C之间；以Sinigrin做底物，甘蓝中葡糖硫苷酶的Km值为1．07mmol／L。关键词：甘蓝，硫代葡萄糖苷，烯丙基硫代葡萄糖

4、苷，葡糖硫苷酶，贮藏lITHERESEARCHABOUTCoNTENT0FGLSANDCHARACTERIZATl0NoFMYROSINASEINCABBAGEABSTRACTGlucosinolates，whichexistsinCruciferaefamily,ItsstructureconsistsofaB-D—thioglucosegrouping，asulfonatedoximemoiety,andasidechainfromaminoacid．Someoftheglucosinolatesareprecursorsfora

5、nti—cancercomponents．Thedegreeofanti-cancerbioactivityisdeterminedbythecontent，typesofglucosinolates，andactivityofmWOSlnaseIon—pairHPLCtechniquewasdevelopedwhentheconcentrationofsinigrinwasdeterminedincabbage，broccoli，andcauliflower．Goodseparationwasobtainedbyusing5mMte

6、tramethylammoniumbromide(100％)asthemobilephaseSinigrin，whichhasanti—canceractivitywasfoundincabbage．Theconcentrationofsinigrinwasdeterminedtobe0．08—0．18mg／grratiooftheweightofsinigrintocabbagefreshweight)usingion—pairHPLC．Theresearchhassuggestedthatthecontentofsinigrinc

7、anbefallby60％atroomtemperatureafterstorageforfivedays．Thelossofsinigrinin111cabbagecanbepreventedbythelow—temperaturestorage，filmpackingandmodifiedatmospherepacking，andthelosscanbereducedtobe34．02％，44．42％，22．88％afterstorageforfivedaysinthesemannersGlucosinolate—myrosina

8、sesystemexistsinplantsandthelatterCalldecomposetheglucosinolateintoisothiocyanateandotheranti—tumorcomponents．