放疗对角质形成细胞上皮间质转化的影响

放疗对角质形成细胞上皮间质转化的影响

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时间:2019-03-16

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1、也,京碱如皆聲院临床医学专业学生毕业论文讀占i:(八年制)'K-f-l确辑i透学校代码:10023学号:2007010巧放疗对角质形成细胞上皮间质转化的影响专业年级:北京协和医学院临床医学专业2007级姓名:徐贝导师:毛晓军(教授)化京协和医院整形外科:20完成曰期15年5月目录1中文摘要2英:^:摘要前胃4参考文献6材料和主要实验技术9一第部A1717胃的实验方案17结果19Wife34参考文献368第二部A3g的38

2、实验方案38结果417476参考文献7879参考文献873致谢9中文摘要一;療痕想瘡是种病理性癒痕研巧背景,在临床上非常多见,具有发红、遠痒、刺痛和烧灼感等显著的临床表现,给患者带来很大的生理和也理负担。癒痕疫溶的发病机制并不明确,最新研究发现疲痕疫疼的发生可能与上皮间质转化(EMT)相关,療痕握痊中的成纤维细胞可能是角质形成细胞经EMT转化而来。癒痕运疮的一治疗方法众多,但无论是手术还是单无创治疗的复发率均较高。手术切除联合术后放疗的方法是治疗療痕挖溶最有效的方法。目前尚无研究从EMT角度出发探索术

3、后放疗抑制疲痕疫落复发的作用机制。研巧目的:探索放疗对人角质形成细胞上皮间质转化的影响。-:对人永生化角质形成细胞HaCaT细胞给予lOng/mlTGFl研究方法p处理,&未经处理的角质形成细胞作为阴性对照,W从手术标本原代培养得到的成纤维细胞作为阳性对照,观察细胞的形态变化,测定处理后1天、3天与7天上皮化与间EMT一沮H质化标志物的表达,确认是否成功构建模型。对aCaT细胞进行9Gy放一HT(-疗,对另组aCa细胞同时给予95y放疗与lOng/mlTGFl处理。观察阴性对p照组-、放疗组与放疗联合TGFP姐细胞的形态变化,进行划痕实验检测细胞

4、的迁移能力,测定处理后1天、3天与7天上皮化与间质化标志物的表达。1HaCaTOnTGF-结果;.对细胞进行lg/mlpi处理后,观察到细胞形态从典型的角质形成细胞形态转变为类似成纤维细胞的形态;而放疗后细胞形态未发生明显的变化,同时细胞死亡速率加快。2.划痕实验结果显示未经处理的HaCaT细胞迁-移能力最弱,在TGFpl诱导下发生了EMT的细胞迁移能力最强,对HaCaT细胞斤放疗之后aaT-,细胞的迁移能力略有增强,对HC行放疗与TGFpl双重处理之后,--细胞的总体迁移能力与单纯行T邱i处理相似,略弱于后者。3.经过TGF31处pJ-理后

5、1天、3天和7天细胞的上皮化标志物ZO1与CDH1的基因表达和蛋白表达显著下调(P<〇.〇5),间质化标志物CDH2的基因表达与蛋白表运上调,FN1的基P<05Vimentin的蛋白表达上调。41因表达显著上调(.0),.放疗后培养天与3天的细胞中上皮化标志物的基因表达和蛋白表达均上调,间质化标志物的基因表达和--蛋白表达下调。5.放疗联合TGFlCadherin蛋白表达之外p姐细胞除了E,其余上-皮化标志物的基因表达和蛋白表达均高于TGFpi组间质化标志物除了CDH2的;--基因表达与TGFpi组相似,其余标志物的基因表达和蛋白表达低于TGFpi

6、组。-结论:TGFpl成功地构建了HaCaT细胞EMT环境。放疗对HaCaT细胞EMT的影响总体(^^抑制为主。关键词-i:癒痕挖癒放疗;上皮间质转化TGFp1-Roleofradia村ononeithelialmesenchmalpytransi村oninkeratinoctesyAbstractBackround-g:Keloidasaatholoicwoundhealinresultisacommonlyseenpggdisorderi打lasticandreco打structivedeart

7、ment.Varioussmtomsofkeloidincludinppypgrednessitchinessainandburninsensationcauseseverehsicalandscholoical,,pgpypygburdentoatie打ts.Themedia打ismofkeloidisnotfollestaWishedHow.everrecentpy,-maresearchessuggestedaroleof

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