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时间:2019-03-16
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1、也,京碱如皆聲院临床医学专业学生毕业论文讀占i:(八年制)'K-f-l确辑i透学校代码:10023学号:2007010巧放疗对角质形成细胞上皮间质转化的影响专业年级:北京协和医学院临床医学专业2007级姓名:徐贝导师:毛晓军(教授)化京协和医院整形外科:20完成曰期15年5月目录1中文摘要2英:^:摘要前胃4参考文献6材料和主要实验技术9一第部A1717胃的实验方案17结果19Wife34参考文献368第二部A3g的38
2、实验方案38结果417476参考文献7879参考文献873致谢9中文摘要一;療痕想瘡是种病理性癒痕研巧背景,在临床上非常多见,具有发红、遠痒、刺痛和烧灼感等显著的临床表现,给患者带来很大的生理和也理负担。癒痕疫溶的发病机制并不明确,最新研究发现疲痕疫疼的发生可能与上皮间质转化(EMT)相关,療痕握痊中的成纤维细胞可能是角质形成细胞经EMT转化而来。癒痕运疮的一治疗方法众多,但无论是手术还是单无创治疗的复发率均较高。手术切除联合术后放疗的方法是治疗療痕挖溶最有效的方法。目前尚无研究从EMT角度出发探索术
3、后放疗抑制疲痕疫落复发的作用机制。研巧目的:探索放疗对人角质形成细胞上皮间质转化的影响。-:对人永生化角质形成细胞HaCaT细胞给予lOng/mlTGFl研究方法p处理,&未经处理的角质形成细胞作为阴性对照,W从手术标本原代培养得到的成纤维细胞作为阳性对照,观察细胞的形态变化,测定处理后1天、3天与7天上皮化与间EMT一沮H质化标志物的表达,确认是否成功构建模型。对aCaT细胞进行9Gy放一HT(-疗,对另组aCa细胞同时给予95y放疗与lOng/mlTGFl处理。观察阴性对p照组-、放疗组与放疗联合TGFP姐细胞的形态变化,进行划痕实验检测细胞
4、的迁移能力,测定处理后1天、3天与7天上皮化与间质化标志物的表达。1HaCaTOnTGF-结果;.对细胞进行lg/mlpi处理后,观察到细胞形态从典型的角质形成细胞形态转变为类似成纤维细胞的形态;而放疗后细胞形态未发生明显的变化,同时细胞死亡速率加快。2.划痕实验结果显示未经处理的HaCaT细胞迁-移能力最弱,在TGFpl诱导下发生了EMT的细胞迁移能力最强,对HaCaT细胞斤放疗之后aaT-,细胞的迁移能力略有增强,对HC行放疗与TGFpl双重处理之后,--细胞的总体迁移能力与单纯行T邱i处理相似,略弱于后者。3.经过TGF31处pJ-理后
5、1天、3天和7天细胞的上皮化标志物ZO1与CDH1的基因表达和蛋白表达显著下调(P<〇.〇5),间质化标志物CDH2的基因表达与蛋白表运上调,FN1的基P<05Vimentin的蛋白表达上调。41因表达显著上调(.0),.放疗后培养天与3天的细胞中上皮化标志物的基因表达和蛋白表达均上调,间质化标志物的基因表达和--蛋白表达下调。5.放疗联合TGFlCadherin蛋白表达之外p姐细胞除了E,其余上-皮化标志物的基因表达和蛋白表达均高于TGFpi组间质化标志物除了CDH2的;--基因表达与TGFpi组相似,其余标志物的基因表达和蛋白表达低于TGFpi
6、组。-结论:TGFpl成功地构建了HaCaT细胞EMT环境。放疗对HaCaT细胞EMT的影响总体(^^抑制为主。关键词-i:癒痕挖癒放疗;上皮间质转化TGFp1-Roleofradia村ononeithelialmesenchmalpytransi村oninkeratinoctesyAbstractBackround-g:Keloidasaatholoicwoundhealinresultisacommonlyseenpggdisorderi打lasticandreco打structivedeart
7、ment.Varioussmtomsofkeloidincludinppypgrednessitchinessainandburninsensationcauseseverehsicalandscholoical,,pgpypygburdentoatie打ts.Themedia打ismofkeloidisnotfollestaWishedHow.everrecentpy,-maresearchessuggestedaroleof
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