姜黄素对aβ25-35至pc12细胞损伤的保护作用

姜黄素对aβ25-35至pc12细胞损伤的保护作用

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1、温州医学院硕士学位论文论文评阅人:答辩委员会成员:筮坦鲑麴援湿划匡堂院阻届筮二匡瞳鏖醉科樊堡垡副数援遏划医堂陵附届箍盍医医丽水市人民医院麻醉科温州医学院硕士学位论文目录一、缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1二、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2三、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3四、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5五、材料与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6六、实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8七、结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14八、分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20九、小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..22十、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..23十一、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25十二、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.27十三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35十四、独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37温州医学院硕士学位论文缩略词表CurCurc吼in姜黄素A

3、pamyloid.13peptidep-淀粉样蛋白HMGB1Highmobilitygroupbox.1高迁移率族蛋白1ROSreactiveoxygenspecies活性氧MTTthiazolylblue噻唑蓝PCI2cellRatpheochromocytomacell鼠肾上腺嗜铬瘤细胞TNF.仪turnornecrosisfactor-or肿瘤坏死因子DMSOdim幽y1sulfoxide二甲基亚砜NF—r.BnuclearfactorKappaB核转录因子一r.BPBSPhosphateBufferedSaline

4、磷酸盐缓冲液PFAParaformaldehyde多聚甲醛温州医学院硕士学位论文姜黄素对All2弼5致PCI2细胞损伤的保护作用硕士研究生:周俊导师:李军教授中文摘要目的:本研究采用B-淀粉样蛋白(amyloid.ppeptide,A1325.35)致鼠肾上腺嗜铬瘤细胞PCI2(Ratpheochromoeytoma)损伤为AD模型,采用细胞形态学观察及细胞活力检测,应用免疫荧光和免疫印迹技术检测HMGBl在细胞的表达情况,探讨I-IMGBl在AD病理过程中的重要性和干预价值,为姜黄素进一步用于AD患者提供理论基础和实验依

5、据。方法:取对数期生长的PCI2细胞分为5组:正常细胞组(A组)、AD25-35模型组(B组)、姜黄素Cur+Ap25.35治疗组(C组),rHMGI+A1325_35损伤组(D组),溶剂对照组DMSO+Ap25-35(E组)。(1)A组不做任何处理;(2)B组加入终浓度为20lJmol/L的AB25.35;(3)C组同时加入终浓度为20pmol/L的A1325.35和终浓度为1I_tmol/L的Cur共同孵育(姜黄素被溶解于1pl/mlDMSO)。(4)D组同时加入500ng/ml的HMGBl+20IxmoltL的Ap2

6、5蕊(5)E组同时加入终浓度为2011mol/L的AB25.35和llal/ml的DMSO,孵育24小时后进行细胞形态学观察,细胞免疫荧光定性和Westernblot法检测HMGBl等蛋白表达情况。结果:1、姜黄素可以减轻AD细胞毒性。与A组相比,B、D、E组细胞活力下降明显(尸0.05)。2、姜黄素能够降低HMGBl的表达。Westemblot结果显示,与A组相比,B、D、E组细胞内HMGBl表达升高(P<0.05);

7、与B组相比,C组的HMGBl的表达下降(P0.05)。3、姜黄素可能抑制HMGBl的胞外释放。免疫荧光定性结果显示,与A组相比,B组存在大量的HMGBl胞核外释放情况;和B组相比,C组HMGBl的胞外释放情况减少。结论:AB25.35引起PCI2细胞毒性:姜黄素可减轻A1325—35引起的PCI2细胞毒性;姜黄素可减少AB25-35引起的PCI2细胞中HMGBl的表达,并抑制HMGBl的胞外释放。【关键词】阿尔茨海默病;姜黄素:13-淀粉样蛋白;PCI2细胞;高迁移率

8、族蛋白12温州医学院硕士学位论文ProtectiveeffectofCurcuminagainstAli2s-as—inducedneurotoxicityindifferentiatedPCI2cellsPostgraduate:ZhouJunTutor:profLiJunBackground:InO

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