allopregnanolone对aβ25-35至pc12细胞损伤的保护作用

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1、论文题目：Allopregnanolone对Ap2硒5PCI2细胞损伤的保护作用论文评阅人：答辩委员会主席：芒筮塾援逝江太堂附属箍三医院鏖醛型答辩委员会成员：俭坦鲑塾援湿趔医堂院随届箍二医院鏖醛型樊堡堡塾拯逞趔医堂院附属箍盍医院匦抽：人民医院麻醉科论文答辩日期：2013．5．10温州医学院硕士学位论文目录一、缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1二、中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2三、英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3四、前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯5五、材料与仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6六、实验方法及结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯10七、讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19八、小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20九、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2l十、附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23十一、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25十二、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26十三、参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3

3、0十四、独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯34温州医学院硕士学位论文缩略词表缩略词英文全称中文全称AD．姆ABAlzheimer’SDisease阿尔茨海默病Allopregnanolone别孕烯醇酮amyloid．ppeptidep一淀粉样蛋白HMGB1Highmobilitygroupbox．1高迁移率族蛋白1ROSMDASODreactiveoxygenspeciesMalondialdehyde活性氧丙二醛superoxidedismutase超氧化物歧化酶MTTthiazolylbl

4、ue噻唑蓝PC12Ratpheochromocytoma鼠肾上腺嗜铬瘤细胞DCFH．DA2,7一dichlorofluorescindiacetate2,7．二氯二氢荧光素二乙酯DMSOdimathhylsulfoxide二甲基亚砜NF．r．BnuclearfactorKappaB核转录因子．1出PBSPhosphateBufferedSaline磷酸盐缓冲液PFAParaformaldehyde多聚甲醛温州医学院硕士学位论文Allopregnanolone对Ap2孓35至PCI2细胞损伤的保护作用硕士研

5、究生：马千导师：李军中文摘要背景：过度累积的p淀粉样蛋白(Ap)是阿尔茨海默病发病机制中最重要的。Ap引起神经毒性的潜在机制包括过多生成活性氧(ROS)和炎症反应。Allopregnanolone是黄体酮的代谢产物，具有许多的生物学活性。本实验是在体外研究Allopregnanolone对Ap25．35引起氧化损伤和炎症的保护作用。方法：对数生长期的PCI2细胞分为3组：正常细胞组、模型组、AP组。细胞培养24h后，AP组加入终浓度为10州的AP预处理2h，再与模型组同时加入终浓度为20}tMAp25-3

6、5继续培养24h收集细胞检测指标。采用MTT比色法分析细胞活力，用分光光度发检测MDA及SOD活性观察细胞氧化应激，流式细胞仪检测ROS，运用westernblot检测胞浆HMGBl蛋白表达。结果：1．AP减轻Ap25．35引起的细胞毒性：(1)A1325．35对细胞的存活率呈剂量相关，其IC50为26．57}tM；(2)10}tMAP可以使细胞存活率提高15．8％。2．AP减轻Ap25-35引起的脂质过氧化并提高抗氧化酶的活性：(1)与对照组相比，20pMAp25．35作用24h后MDA的含量显著增力N

7、(305．1％)，而与Ap25-35组相比，10I．tMAP使MDA的含量下降一半；(2)与对照组相比，20州Ap25-35作用24h后SOD的含量显著减少(35．8％)，而与Ap25．35组相比，101xMAP使SOD的含量增加41．1％。3．AP抑制AD25．35引起的细胞内活性氧的生成：(1)与对照组相比，20_tMAB25．35作用24h后，DCF的强度从140．42+18．21升高到187．31+29．41，(P<0．05，n=5)；(2)IOI上MAP的可以使DCF强度从187．31+29．4

8、1下降到147．78+31．44，(P<0．05，n=5)。4．AP减少HMGBl的表达：与对照组相比，AB25．35组的HNGBl表达升高，与A1325．35组相比，AP组的HMGBl的表达下降。结论：Allopregnanolone可以通过减少MDA和ROS并增加SOD的含量来减轻Ap25．35引起的氧化损伤，并可以减少HMGBl的表达。关键词：Allopregnanolone、A[325．35、HMGBl、氧化损伤、炎症