htrail对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的影响

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1、分类号R5密级学校代码10367UDC61编号学号20096131052hTRAIL对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的影响TheeffectofhTRAILintheapootosisofrheumatoidarthritissynovialfibroblasts论文类别：学术研究型作者姓名陈金指导教师姓名赵福涛申请学位级别硕士学位授予单位蚌埠医学院学科专业内科学研究方向风湿免疫病论文答辩时间2012年5月学位授予日期2012年6月答辩委员会主席：论文评阅人：2012年4月硕士学位论文hTRAIL对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的论文题目：影响TheeffectofhTRAILintheapoptosi

2、sofrheumatoidarthritissynovialfibroblasts研究生姓名:陈金指导教师:赵福涛学科专业:内科学研究方向:风湿免疫病论文工作时间:2011年7月至2012年3月2012年4月学位论文原创性声明本人郑重声明：本人所呈交的学位论文是本人在导师指导下独立进行实验研究工作所取得的成果，本论文中不包含其他人已经发表或已经获取得的研究成果。在本论文撰写中所引用其他研究者的研究内容和成果时已在论文中给予特别标注和明确说明。对本论文的实验研究以及论文撰写过程中给予帮助和建议等贡献的其他人士，也已作了致谢说明。本人完全理解本声明的法律责任，以及所涉及的结果将由本人承担。学位论

3、文作者签名：日期：年月日关于学位论文著作权的共享声明根据《中华人民共和国著作权法》和《高等院校知识产权管理条例》，本学位论文，题目：hTRAIL对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的影响，是研究生在导师指导下完成的职务作品，得到蚌埠医学院相关部门科室的物质技术和经费支持，因此，本学位论文的著作权由研究生，导师和蚌埠医学院三方共同享有，均享有署名权和使用权等权益；本学位论文成果归属蚌埠医学院。根据国家学位授予条例，学校对本学位论文有使用权，包括保存本学位论文；因教学和科研的目的，保留在图书馆被查阅或借阅；学校可根据国家规定将本学位论文送交国家有部门保留和使用。学校在公布本学位论文的全部或部分内容时，应保

4、障研究生和导师的署名权等权益。研究生和导师在公开发表本学位论文的全部或部分内容时必须保障学校的署名权等权益，即在发表论文时蚌埠医学院及相关部门科室应署名为作者单位。声明人完全理解本声明的法律责任。研究生签名：导师签名：日期：年月日目录中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„6材料与方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„8结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„22讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„28结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„33参考文献

5、„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„34致谢„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„39附录A中英文术语缩略语对照表„„„„„„„„„40附录B主要试剂配制方法„„„„„„„„„„„„42附录C综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„51hTRAIL对类风湿关节炎滑膜细胞凋亡的影响中文摘要背景：类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)RA的病理特征主要表现为滑膜细胞的增殖与炎性细胞的浸润，导致滑膜增厚、骨与软骨组织的侵蚀破坏。越来越多的研究表明，RA滑膜成纤维细胞（rheumatoidarthritissynovialfibroblasts,RASFs）的凋亡缺陷

6、是其重要发病机制之一。因此诱导RASFs凋亡、抑制滑膜组织增殖成为治疗RA的关键。肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TNF-relatedapoptosisinducingligand,TRAIL)是近年来新发现的凋亡诱导配体，它具有强大的诱导肿瘤细胞凋亡的能力，但对正常细胞基本没有影响。有研究发现，在IL-1β诱导的兔膝骨关节炎模型中，通过对兔关节腔内注入带有TRAIL基因的腺病毒可使TRAIL介导的炎性滑膜组织凋亡率升高。本实验拟通过重组人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（humanTNF-relatedapoptosisinducingligand,hTRAIL）蛋白体外诱导RASFs的凋亡

7、，以期寻找RA新的治疗方法。目的：探讨重组hTRAIL蛋白对类风湿关节炎滑膜成纤维细胞（RASFs）凋亡的作用。方法：1.获取类风湿关节炎患者的滑膜组织，用酶消化法分离培养原代滑膜细胞。2.滑膜细胞的鉴定：滑膜细胞传至第4代，倒置显微镜下观察滑膜细胞形态，II型胶原鉴定滑膜成纤维细胞。3.细胞增殖实验：不同终浓度hTRAIL干预滑膜细胞，继续培养不同时间后，MTT法检测其对滑膜细胞增殖的抑制作用。4.流式细胞