()棉酚对滑膜肉瘤细胞增殖和凋亡的影响与其机制的研究

《()棉酚对滑膜肉瘤细胞增殖和凋亡的影响与其机制的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、新疆医科大学硕士学位论文（－）-棉酚对滑膜肉瘤细胞增殖与凋亡的影响及其机制的研究研究生：张顺利指导教师:锡林宝勒日副教授摘要目的：探讨（－）-棉酚对人滑膜肉瘤SW-982细胞体外增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法:MTT法检测（－）-棉酚对SW-982细胞的增殖抑制作用；Wright-Giemsa染色、Hoechst33258荧光染色及透射电镜观察（－）-棉酚作用后SW-982细胞形态的变化；流式细胞仪观察（－）-棉酚对细胞周期的调控作用和细胞凋亡率的影响；Westernblot方法分析（－）-棉酚对细胞凋亡相关蛋白Bcl-2，

2、Bax表达水平的影响；比色法研究（－）-棉酚对Caspase-9和Caspase-3活性的影响。结果：（－）-棉酚对人滑膜肉瘤株SW-982具有生长增殖抑制作用，并且这种作用呈时间、剂量依赖效应。随着（－）-棉酚浓度的增加和作用时间的延长，其对细胞增殖的抑制作用明显增强。Wright-Giemsa染色光学显微镜下、Hoechst33258染色荧光显微镜下及透射电镜镜下均可见经4.0μmol/L的（－）-棉酚作用24h后SW-982细胞出现凋亡的特征性形态学改变。经（－）-棉酚作用24h后，随着浓度的增加，SW-982细胞中G0/G1期

3、细胞数比例增加，而G2/M期、S期细胞数比例均有不同程度减少，细胞被阻滞于G0/G1期，表明（－）-棉酚对SW-982细胞具有细胞周期调控作用，AnnexinV/PI双染法流式细胞仪测得细胞早期凋亡率也同（－）-棉酚浓度呈正相关关系。经（－）-棉酚作用24h后，SW-982细胞中的凋亡相关蛋白Bcl-2的表达与（－）-棉酚浓度呈负相关关系，而Bax蛋白的表达与（－）-棉酚浓度呈正相关关系。4.0μmol/L的（－）-棉酚作用不同时间后出现了Caspase-9、Caspase-3活性的变化。作用12h时，Caspase-9活性达到高峰，

4、随后活性呈下降趋势，作用18h时Caspase-3活性达到高峰，随后活性呈下降趋势。结论：本研究证实（－）-棉酚对人滑膜肉瘤株SW-982具有抑制增殖和诱导凋亡的作用，其作用机制可能与Bcl-2蛋白表达水平下调，Bax蛋白表达水平上调，Caspase-9、Caspase-3活性的激活有关，（－）-棉酚诱导SW-982细胞凋亡是由线粒体依赖性细胞凋亡途径完成的。关键词：滑膜肉瘤；（－）-棉酚；凋亡；细胞周期；Bcl-2；Bax；Caspase-9；Caspase-3１新疆医科大学硕士学位论文Studyonmechanismandeffe

5、ctofapoptosisandProliferationby(–)-gossypolonhumansynovialsarcomacellsPostgraduate:ZhangShunliSupervisor:XilinbaoleriABSTRACTObject:TostudytheeftectsofmanrunycinonproliferationandapoptosisofhumansynovialsarcomaSW-982cellsandelucidatethepossiblemechanisms.Methods:MTTcolo

6、rimetricassaywasappliedtodetecttheantiproliferationof(–)-gossypolinsynovialsarcomaSW-982cells;Morphologicalchangesinthenuclearchromatinofcellsundergoingapoptosis.weredeterminedbyWright-Giemsastaining,Hoechst33258stainingandtransmissionelectronmicroscopydetection;Flowcyt

7、ometricassaywasperformedtoevaluatethecellcycleandapoptosisbystainingwithPIaswellasAnnexinV/PI;Theinfluenceof(–)-gossypoltotheexpressionofapoptosis-associatedproteinBcl-2andBaxweredetectedbyWesternblot;Caspase-9andCaspase-3activationwasanalyzedbycolorimetricassay.Results

8、:(–)-GossypolcouldinhibitetheproliferationofsynovialsarcomacellsSW-982indoseandtimedependentmanner.Aftertreate