丹参诱导类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞凋亡

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1、丹参诱导类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞凋亡作者：刘青松，凡瞿明，蒋红，朱兴春，邢艳，唐中【摘要】目的探讨丹参对类风湿关节炎患者成纤维样滑膜细胞凋亡的影响。方法类风湿关节炎患者关节滑液经原代培养，应用3～5代传代的成纤维样滑膜细胞，分为3组，分别为高剂量丹参组(丹参终浓度为50mg/mL)、低剂量丹参组(丹参终浓度为0.39mg/mL)和溶剂对照组，采用流式细胞术结合AnnexinV/FITC和PI双标记染色检测细胞凋亡率。结果与对照组比较，高剂量丹参组和低剂量丹参组细胞凋亡率均较对照组明显增加(P<0.05)，并且高剂量丹参组细胞凋亡率明显大于低剂量丹参组(P<0.05)。结论

2、丹参能有效诱导类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡。【关键词】丹参;类风湿关节炎;成纤维样滑膜细胞;凋亡　ABSTRACT:ObjectiveToexploretheeffectofsalviamiltiorrhizaontheapoptosisoffibroblast-likesynoviosytes(FLSs)frompatientswithrheumatoidarthritis(RA).MethodsFLSswereharvestedfromRApatientsbyprimaryculturejointsynovialfluidandthrough3-5passages.Aftertrea

3、tedwithsalviamiltiorrhizafor24h,cellsweredividedintohigh-dose9(salviamiltiorrhizasfinalconcentrationof50mg/mL),low-dose(salviamiltiorrhizasfinalconcentrationof0.39mg/mL)andsolventgroup.TheapoptosisofRAFLSswasdetectedbyAnnexinV/FITCandPIwithflowcytometry(FCM).ResultsComparedwiththatincontrolgroup,

4、cellapoptosisrateinhigh-doseandlow-dosegroupstreatedwithsalviamiltiorrhizawassignificantlyincreased(P<0.05),anditwassignificantlygreaterinhigh-dosegroupthaninlow-dosegroup(P<0.05).ConclusionSalviamiltiorrhizacaneffectivelyinducetheapoptosisoffibroblast-likesynoviosytesfromrheumatoidarthritisp

5、atients.　　KEYWORDS:salviamiltiorrhiza;rheumatoidarthritis;fibroblast-likesynoviocyte;apoptosis　　类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种以滑膜增生为特征的慢性炎症性自身免疫性疾病，其原因之一为成纤维样滑膜细胞(fibroblast-likesynoviocytes,9FLSs)数量增加和形态改变，并侵蚀邻近的软骨和骨组织[1]。研究证实FLSs在RA病程发展过程中具有独特的作用[1]。FLSs在RA持续炎症发展和血管发生中具有重要作用[2-4]。丹参为中国的传统中药，最早

6、见于《神农本草经》，常用于治疗冠心病及缺血性脑血管病，且疗效颇佳，已被现代临床实验和药理实验研究所证实具有活血化瘀、诱导肿瘤细胞凋亡等多方面的药理活性[2-3]。近年来，已有应用丹参治疗RA的报道，并取得满意的效果[4-5]，但对丹参治疗RA的机制鲜有报道。由于RAFLSs具有肿瘤细胞特性，本实验从丹参能诱导肿瘤细胞凋亡的特点出发，探讨丹参对RAFLSs凋亡的影响。　　1材料与方法　　1.1材料在川北医学院附属医院类风湿科就诊的有膝关节积液的RA患者5例，其中男2例，女3例，年龄27～64周岁，平均年龄46.5周岁。所有患者均符合美国风湿病学会1987年的RA诊断标准。滑膜细胞分离自患者滑液

7、，经体外培养获得。DMEM培养基(GibcoBRL公司);胎牛血清(HyClone北京生物化学制品有限公司);胰酶;AnnexinV/PI凋亡试剂盒(ABGAB，美国);注射用丹参[冻干](哈药集团中药二厂，成分为丹参，生产批号：090313);流式细胞仪(BectonDickinson);倒置显微镜(OLYMPUSIX71)。　　1.2方法　　1.2.1滑膜细胞的分离与培养采用滑液中的游离滑膜细胞进行培养。