PIMT对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响-论文.pdf

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1、张慧等PIMT对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响第8期·lOl5·doi：10．3969／j．issn．1000-484X．2014．08．002PIMT对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞凋亡的影响①张慧宗明李牛虞珊珊孙立山范列英(上海市东方医院同济大学附属东方医院，上海200120)中图分类号R$93．22文献标志码A文章编号1000-484X(2014)08—1015-04[摘要]目的：探讨蛋白异天冬氨酰甲基转移酶(Proteinisoaspartyl—methyhransferase，PIMT)过表达对类风湿关节炎(Rh

2、eumatoidarthritis，RA)成纤维样滑膜细胞(Fibrob

3、ast—likesynoviocytes，FLS)凋亡的影响。方法：构建PIMT表达载体，转染RAFLS细胞，检测PIMT在RA—FLS细胞表达水平，观察转染后RA-FLS细胞的凋亡情况。结果：转染后的RA-FLS细胞PIMTmRNA和蛋白质表达水平上升，与正常对照和转染空载体的RA．FLS细胞阴性对照相比较，转然后RA—FLS细胞的凋亡增加。结论：PIMT在RA．FLS细胞中表达下降是RA—FLS细胞凋亡减少的一个重要原因，PIMT在RA—FLS细胞增殖

4、／凋亡失调中起作用。[关键词]类风湿关节炎；成纤维样滑膜细胞；蛋白异天冬氨酰甲基转移酶；细胞凋亡InfluenceofPIMTonapoptosisoffibroblast--likesynoviocytesinrheumatoidar-thritisZHANGHui，ZONG，LINiu，YUShan—Shan，SUNLi—Shan，FANLie-Ying．DepartmentofClinicalLaboratory，ShanghaiEastHospital，SchoolofMedicine，TongiiUniversity，

5、Shanghai200120，China[Abstract]Objective：Toprovetheinfluenceofproteinisoaspartyl—methyhransferase(PIMT)onthecellapoptosisoffibroblast．1ikesynoviocytesofRA。Methods：TheexpressionvectorofPIMTwasconstructedandtransfectedintotheRA—FLS，theimpactofPIMTonthecellapoptosisofRA—

6、FLSwasobservedbyoverexpressingthevectorofPIMT．Results：ThemRNAandproteinlevelofPIMTinRA—FLSwasincreasedaftertransfeetedthevectorofPIMTintoRA—FLS；comparedwiththenormalculturedRA—FLSandtheRA—FLStransfeetedwiththeemptyvectors，thecellapoptosislevelwasalsoincreased．Conclus

7、ion：ThedecreasedexpressionlevelofPIMTinRA—FLSisanimportantreasonforreduceapoptosisofRA—FLS，andPIMTcanaffecttheimbalanceofproliferation／ap—optosisintheRA—FLS．[Keywords]Rheumatoidarthritis；Fibroblast—likesyn0viocytes；Pmteinisoaspartyl-methy1tmnsfemse；cellapoptosis前期研究发

8、现蛋白异天冬氨酰甲基转移酶1材料与方法(Proteinisoasparty1．methyltransferase，PIMT)在类风湿性关节炎(Rheumatoidarthritis，RA)滑膜成纤维1．1材料样细胞(Fibroblast—likesynoviocytes，FLS)中表达下1．1．1细胞原代RA—FLS(本室保存)降¨J，而PIMT是与细胞增殖、凋亡相关的甲基转移1．1．2载体peDNA3．1(一)B．flag(本室保存)。酶]。本研究通过将PIMT表达载体转染RA-1．1．3引物设计与合成FLS，在RA．FLS细

9、胞中的过表达PIMT，探讨PIMT1．1．3．1PIMT表达质粒引物的设计与合成根据对于RA—FLS细胞凋亡的影响。NCBI数据库中PIMT基因mRNA序列设计扩增引物，primerl：5．TAACTCGAGACCATGCCGGGAGCG—①本文由国家自然科学基