n-乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后il-6与il-10表达水平的影响

《n-乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后il-6与il-10表达水平的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、兰州大学硕士学位论文究表明【8IROS能激活NF-kB的活性，从而上调Ib6的表达水平。同时NAC具有直接清除氧自由基作用，其脱乙酰基后成为谷胱甘肽合成的前体，能增加细胞内谷胱甘肽的水平，增强组织的抗自由基作用，并能稳定细胞膜结构，稳定谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶，保持其活性，并对诱导型氧化氮合酶mRNA的表达有抑制作用。。进而减少NO的产生唧。IL-6是近年来研究较多的重要的促炎症细胞因子之一，大部分中枢神经系统细胞均可产生IL-6，研究表明Ib6可通过在募集大量炎症细胞、诱导细胞间黏附分子的表达、增强兴奋性氨基酸毒性和降低脑血流量等方面发挥其继发性脑

2、损害作用。IL-10是近年来研究较多的抗炎症细胞因子，其抗炎症作用已在大量的体内外及动物试验中得到证实【地11—21。IL．10可在转录水平抑制细胞因子和趋化因子的产生，也可通过调控mRNA降解的机制在转录后水平发挥作用；几．10可上调体内细胞因子拮抗剂如几．1RA及可溶性的P55、1'75TNFR基因的表达，从而拮抗促炎症细胞因子的促炎作用；lL．10可通过下调环氧化酶．2(cox-2)的表达来抑制前列腺素PGE-2的产生；Ⅱ■10还可下调LPS信号传导通路中介导天然免疫的受体Toll样受体的表达，从而间接减轻炎症反应；此外几．10．可抑制NF-KB、Ras

3、等信号转导通路，从而抑制多种相关的重要炎性介质的产生．一本研究拟采用自由落体法建立大鼠颅脑创伤模型，应用双抗体夹心酶联免疫(EusA)分析假手术组、干预组及创伤组[L．-6和IL-10血清表达水平的变化并用千湿重法测定脑组织含水量。观察NAC对促炎因子IL-6与抗炎因子ILl0的表达影响，以探讨NAC对脑创伤的保护作用，为临床寻找新的有效治疗方法提供理论依据．2兰州大学硕士学位论文第一部分动物实验模型的建立及标本制备材料和方法一、实验材料(一)实验动物与分组．选取健康、雄性Wistar大鼠，SPF级，体重(260_+20)g【由甘肃省中医学院动物实验中心提供，

4、动物质量合格证号为SCXlq甘)2004-0006。随机数字表法分为假手术对照组(5只)、颅脑创伤组(TBIg)和NAC干预组(NACg)后二者又分伤后3h、12h、24h、48h、72h、5d和7d，七个时间组，每组5只，共75只。(二)实验器械与仪器1．动物实验操作台(_兰州军区总医院动物实验中心提供)2．动物实验用手术器械(兰州军区总医院动物实验中心提供)3．自由落体颅脑创伤模型制作装置(自制)．4．电动离心机(80-1型金坛市恒丰仪器厂)5．扬子直立冷式冰箱(扬子电气公司电冰箱总厂)6．磁力加热搅拌器(79一l型江苏江阴科研器械厂)7．扭力托盘天平(T

5、N型上海第二天平仪器厂)8．架盘药物天平(北京医用天平厂)．9．电子分析天平(BP201S赛多利斯有限公司中国，10．其超净工作台、移液枪、400H筛网(兰州军区总医院动物实验中心提供)11．MultiskanMk3酶标仪(芬兰ThermoLabs)stems)(兰州军区总医院动物实验中心提供)(三)实验试剂与药品一1．戊巴比妥钠(北京通县育才精细化工厂批号笳0427)2．硫酸庆大霉素(兰州制药厂>3．骨蜡(兰州军区兰州总医院制剂室)4。吸收性明胶海绵(金陵药业股份有限公司)3兰州大学硕士学位论文5．生理盐水(兰州军区兰州总医院制剂室)6．70％乙醇(自配)7

6、．4％多聚甲醛以1％咖㈣酸盐缓冲液(自配>配制方法：称取409多聚甲醛，置于三角烧瓶中，加入800ralO．1mol／I麟酸缓滞液(PhosphateBuffcr以T简称PBS)，加热至60℃左右，磁力搅拌使粉末完全溶解，滴加少许NaOH溶液才能使多聚甲醛溶液清亮，最后用0．1moFL的PB补足1000ml，充分混匀。8．PBS磷酸盐缓冲溶液(O．01M，pH7。2—7．4×自配>配制方法：磷酸氢二钠Na2HP04．12H202．99磷酸二氢钠NazHP040．39氯化钠，8．59双蒸水1000ml二、实验方法(一)颅脑创伤模型的制作本实验采用Feeney法制

7、作颅脑创伤模型1131。具体方法如下：将实验大鼠提前3天单独喂养，术前禁食12d'时，不禁水，称体重。实验动物用戊巴比妥钠(60mg／kg)腹腔注‘射麻醉后，俯卧位将头部固定于立体定向仪上，头顶去毛，消毒皮肤，沿中线切开头皮约1．50n,剥离骨膜，暴露右顶骨，用牙科钻在冠状缝后1．5mm、中线旁2．5mm处钻孔，并用血管钳扩大成一直径约5mm的骨窗，保持硬脑膜完整。将撞杆置于硬膜上，用409砝码于25cm高处沿外周导管坠落，撞击撞杆从而撞击硬膜，致右顶叶脑挫裂伤。打击后硬膜外置明胶海绵止血，伤口内滴注4万单位硫酸庆大霉素4—5滴，骨蜡封闭骨窗，缝合头皮。对照组

8、仅开颅窗不施加打击，骨蜡封闭骨窗，缝合