n乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后icam1和nfκb表达的影响

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1、N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1和NFκB表达的影响【关键词】颅脑损伤N乙酰半胱氨酸核因子κB细胞间黏附因子1　　Abstract：ObjectiveToexploretheeffectofNAConNFκBandICAM1expressionaftertraumaticbraininjury(TBI)inrats,anddiscussthemechanismsofneuroprotectionbyNAC.MethodsNiyadultmale1andNFκBaticbraininjury,andNACsignificantlydecreased

2、theexpressionofICAM1andNFκB.ConclusionExpressionofNFκBandICAM1decreasedbyNACmightbeoneofthemechanismsinregulatingICAM1,NFκBlevelandinhibitinginflammationincortexandexertingprotectivefunctiontoneurons.　　KeypusDP70成像系统，Imageproplus5.0(IPP5.0)数据分析系统，NAC（Sigma公司），大鼠立体定向仪(江湾Ⅱ型,上海)，ICAM

3、1多克隆抗体（兔抗）（北京博奥森生物技术有限公司）；NFκBp65(F6)：sc8008(鼠抗)（SantaCruz公司），二步法免疫组化试剂盒(抗鼠和抗兔IgGPV6001/6002)、SP试剂盒和DAB试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）；3月龄健康雄性1的表达，一抗均按1：150稀释，分别严格按SP和二步法试剂盒说明书操作。　　免疫阳性染色细胞和血管显微镜下表现为深黄色或棕褐色。在DympusDP70成像系统高倍光学显微镜下（×400），每张切片任选6个非重叠高倍视野进行观察，对ICAM1免疫染色血管进行计数并计算平均值，NFκB免疫组化染色标记

4、强度用光密度值(opticaldensity,OD)表示，比较各组OD值。　　结果　　1ICAM1表达的变化　　ICAM1免疫阳性染色表现为深黄色或棕褐色，主要定位于血管内皮细胞，且主要集中在皮层血管，脉络丛只有少量免疫染色血管（图1a、b和c、d）。NS对照组伤后3小时即可见免疫染色血管开始增多，12小时明显增多，72小时小时达到高峰，之后开始下降，7天时可见明显下降。与sham组相比，TBI组和NAC组3小时组阳性血管数虽有升高，但均无统计学意义（P>0.05），余各时间点均明显增高，有非常显著性差异（P<0.01）；NAC组与TBI组相比，3小时组

5、免疫阳性血管数无明显减少（P>0.05），12小时和7天组时，免疫阳性血管数减少，有显著性差异（P<0.05），24、48、72小时和5天组可见免疫阳性血管数明显减少，有非常显著性差异（P<0.01)（见图2）。　　2NFκB蛋白表达的变化　　NFκB阳性染色定位于胞浆和(或)核膜，呈黄色或棕黄色(图1e、f和g、h)。颅脑损伤后3小时在伤侧脑组织中即可见NFκB表达，12小时表达明显升高，24小时达高峰，后表达水平逐渐下降，与sham组比较均有非常显著性差异(P<0.01)；NAC治疗组伤后NFκB表达自3小时即明显下降，与损伤12、2

6、4、48、72小时组相比，NFκB表达显著下降，差异非常显著(P<0.01)，与损伤5天和7天组相比差异显著(P<0.05)(见表1)。　　a、b.分别为TBI组的24小时和72小时组伤侧脑组织ICAM1的表达变化；c、d.分别为NAC组相应时间点ICAM1的表达变化(如箭头所示)；e、f.分别为TBI组的24小时和48小时组伤侧脑组织NFκB的表达变化；g、h.分别为NAC组相应时间点NFκB的表达变化(如箭头所示)　　图1颅脑损伤后ICAM1和NFκB表达变化(SP×400)（略）　　与TBI组相比：*P<0.01,P<0.05

7、；与Sham组比较：#P<0.01,$P>0.05；与sham组和TBI组比较：**P>0.05　　图2NAC对大鼠颅脑损伤后不同时间点伤侧脑组织ICAM1表达的影响（略）　　表1NAC对大鼠颅脑伤后不同时间点伤侧脑组织NFκB表达的影响（略）　　与TBI组比较：*P<0.01，ΔP<0.05；与sham组相比：＃P<0.01　　创伤性脑损伤后的继发性脑损害与很多因素有关，炎症反应能够促进继发性损害，是继发性脑损伤的主要原因之一［7］。NFκB是炎症反应的一个重要信号转导分子，在脑损伤的炎症反应中