n乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后icam1和n

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1、N乙酰半胱氨酸对大鼠颅脑损伤后ICAM1和N【摘要】  目的观察N乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠颅脑损伤后细胞间黏附因子1(ICAM1)和核转录因子κB(NFκB)表达的影响,探讨其脑保护机制。方法90只1表达的变化。结果与假手术组相比,脑损伤组NFκB和ICAM1表达水平明显升高,NAC可降低NFκB和ICAM1表达,减轻炎症反应。结论NAC可能通过抑制NFκB和ICAM1的表达,减轻炎症反应,发挥脑保护作用。【关键词】颅脑损伤N乙酰半胱氨酸核因子κB细胞间黏附因子1  Abstract:ObjectiveToexploretheeffectofNACon

2、NFκBandICAM1expressionaftertraumaticbraininjury(TBI)inrats,anddiscussthemechanismsofneuroprotectionbyNAC.MethodsNiyadultmale1andNFκBaticbraininjury,andNACsignificantlydecreasedtheexpressionofICAM1andNFκB.ConclusionExpressionofNFκBandICAM1decreasedbyNACmightbeoneofthemechanismsinregulat

3、ingICAM1,NFκBlevelandinhibitinginflammationincortexandexertingprotectivefunctiontoneurons.  KeypusDP70成像系统,Imageproplus5.0(IPP5.0)数据分析系统,NAC(Sigma公司),大鼠立体定向仪(江湾Ⅱ型,上海),ICAM1多克隆抗体(兔抗)(北京博奥森生物技术有限公司);NFκBp65(F6):sc8008(鼠抗)(SantaCruz公司),二步法免疫组化试剂盒(抗鼠和抗兔IgGPV6001/6002)、SP试剂盒和DAB试剂盒(北京中杉金桥生物技

4、术有限公司);3月龄健康雄性1的表达,一抗均按1:150稀释,分别严格按SP和二步法试剂盒说明书操作。  免疫阳性染色细胞和血管显微镜下表现为深黄色或棕褐色。在DympusDP70成像系统高倍光学显微镜下(×400),每张切片任选6个非重叠高倍视野进行观察,对ICAM1免疫染色血管进行计数并计算平均值,NFκB免疫组化染色标记强度用光密度值(opticaldensity,OD)表示,比较各组OD值。  结果  1ICAM1表达的变化  ICAM1免疫阳性染色表现为深黄色或棕褐色,主要定位于血管内皮细胞,且主要集中在皮层血管,脉络丛只有少量免疫染色血管(图1a、b和c、d)。

5、NS对照组伤后3小时即可见免疫染色血管开始增多,12小时明显增多,72小时小时达到高峰,之后开始下降,7天时可见明显下降。与sham组相比,TBI组和NAC组3小时组阳性血管数虽有升高,但均无统计学意义(P>0.05),余各时间点均明显增高,有非常显著性差异(P<0.01);NAC组与TBI组相比,3小时组免疫阳性血管数无明显减少(P>0.05),12小时和7天组时,免疫阳性血管数减少,有显著性差异(P<0.05),24、48、72小时和5天组可见免疫阳性血管数明显减少,有非常显著性差异(P<0.01)(见图2)。  2NFκB蛋白表达的变化  NF

6、κB阳性染色定位于胞浆和(或)核膜,呈黄色或棕黄色(图1e、f和g、h)。颅脑损伤后3小时在伤侧脑组织中即可见NFκB表达,12小时表达明显升高,24小时达高峰,后表达水平逐渐下降,与sham组比较均有非常显著性差异(P<0.01);NAC治疗组伤后NFκB表达自3小时即明显下降,与损伤12、24、48、72小时组相比,NFκB表达显著下降,差异非常显著(P<0.01),与损伤5天和7天组相比差异显著(P<0.05)(见表1)。  a、b.分别为TBI组的24小时和72小时组伤侧脑组织ICAM1的表达变化;c、d.分别为NAC组相应时间点ICAM1的表达变

7、化(如箭头所示);e、f.分别为TBI组的24小时和48小时组伤侧脑组织NFκB的表达变化;g、h.分别为NAC组相应时间点NFκB的表达变化(如箭头所示)  图1颅脑损伤后ICAM1和NFκB表达变化(SP×400)(略)  与TBI组相比:*P<0.01,P<0.05;与Sham组比较:#P<0.01,$P>0.05;与sham组和TBI组比较:**P>0.05  图2NAC对大鼠颅脑损伤后不同时间点伤侧脑组织IC

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