二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群乙酰化gc指纹图谱比较研究

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1、世界科学技术—中医药现代化绎中药研究本文经编委遴选,英文版将通过ScienceDirect全球发行。二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群乙酰化GC指纹图谱比较研究元元元阴李欣尹莲(南京中医药大学药学院南京210046)元元段金廒(江苏省方剂研究重点实验室南京210046)南京中医药大学药学院南京210046丁安伟()江苏省方剂研究重点实验室南京210046摘要:目的:为探索类方方剂配伍物质基础变化特征,研究二妙丸类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加味四妙丸)配伍物质基础的变化规律。方法:建立加味四妙丸抗湿热证痛风有效部位群乙酰化GC指纹图谱,利用对照品和组方药材确定指纹图谱共有峰成分、组

2、方药色谱峰归属,测定二妙丸类方有效部位群乙酰化GC指纹图谱,比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化。结果:加味四妙丸有效部位群乙酰化GC图谱有26个共有峰,有葡萄糖、木糖及来源于组方药的苍术、牛膝、薏苡仁等。基础方与类方间水液部位乙酰化指纹图谱共有峰在数目及相对峰面积比值方面呈现一定的变化规律。结论:二妙丸及其类方有共同的物质基础,从基础方到各类方,物质基础的配伍变化具有相关性。关键词:二妙丸类方有效部位群乙酰化作用GC指纹图谱配伍变化在二妙丸类方中,基础方二妙丸(EM)是燥湿清由生物碱、黄酮、有机酸、水液(单糖、低聚糖)等各类热的经典方,源于朱丹溪的《丹溪心法》,由苍术、黄成分组

3、成,抗湿热证痛风的生物效应存在着一定的[1]柏组成,临床用于治疗足膝红肿热痛、下肢丹毒、风联系和变化规律,并比较了有效部位群中生物碱、黄湿热痹、湿热带下等病。三妙丸(S3M)是在EM基础酮、有机酸部位HPLC指纹图谱,基础方EM中的黄[3]上加牛膝,专治下焦湿热之痹证。四妙丸(S4M)在柏生物碱部位在类方配伍中呈现较大的变化规律。[1]S3M基础上加薏苡仁,主治湿热下注之痿证。临床二妙丸类方水液部位主要来自苍术、牛膝、薏苡仁及常用S4M加清热药(忍冬藤和土茯苓)即加味四妙丸加味药,其中,苍术水液部位有一定的降尿酸、抗炎[2](GSM)治疗急性痛风,EM、S3M加味治疗痛风也均作用

4、。文献研究表明,水溶性成分抗炎活性与挥发油[4]有临床报道。前期研究表明,二妙丸类方有效部位群相当,但其它组方药相关成分及其活性研究报道很少。本实验进一步研究二妙丸类方抗湿热证痛风有收稿日期:2008-10-14效部位群水液部位在类方中的配伍变化规律。修回日期:2008-11-24元江苏省方剂研究重点实验室开放项目(022021014010):抗痛风二妙丸类方效应物质基础的关联研究,负责人:尹莲;南京中医药大学基础研究与重点培育项目(08xpy04):抗痛风二妙丸类方效应物质基础的关联研究,负责人:尹莲。元元联系人:尹莲,教授,主要研究方向:复方化学及配伍规律研究,E-mail:

5、yinlian162@163.com;段金廒,本刊编委,教授,主要研究方向:中药及天然药物化学,天然药物资源化学及植物化学分类学,方剂现代研究与新药创制。也WorldScienceandTechnology/ModernizationofTraditionalChineseMedicineandMateriaMedica页44PDF文件使用"pdfFactoryPro"试用版本创建www.fineprint.cn2009第十一卷第一期绎Vol.11No.1目前,水溶性糖醇类成分主要用气相色谱分析组方药有效部位样品制备:各称取苍术、牛膝、薏方法。常用的衍生化方法有三甲基硅烷化(TM

6、S)、甲苡仁、土茯苓、忍冬藤2g,75%乙醇浸泡过夜,超声半[5]基化和乙酰化,这3种方法各有利弊。TMS化方法小时,过滤,回收乙醇后,用正丁醇萃取,水层部位按-1简便,成本低廉,但其衍生化产物分子量大,往往会上述方法乙酰化,用氯仿定容得1g·mL样品溶液。[6]影响分离效果,产物极易水解。用甲基化衍生的方2.色谱条件法分析特异性低,对于某些物质的分离效果不理想色谱柱:HP-INNOWAX毛细管色谱柱(30m伊[7]。糖类物质制备乙酰化物多采用吡啶作溶剂,分子0.45mm伊0.1mm)。测定条件:气化室温度250益,载气量适中,成分能有效分离。为充分表征二妙丸类方有为氮气,检测器

7、FID,柱前压10psi,进样量1滋l,进样原1效部位群水液部位整体成分信息,探索抗湿证痛风口温度250益。梯度升温:120益~4益·min原200益。物质基础配伍变化的规律,本实验采用吡啶-醋酸酐3.方法学考察法制备二妙丸类方有效部位群水液部位乙酰化物,(1)精密度考察。建立GC指纹图谱,比较二妙丸类方水液部位物质基取GSMP乙酰化供试液,连续进样6次,按2.2项础配伍变化特征。下色谱条件测定色谱图,各共有峰相对保留时间RSD均小于0.5%,占总峰面积10%以上的共有峰相一、仪

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