左金丸及类方的HPLC指纹图谱研究.pdf

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1、华南师范大学学报(自然科学版)2012年5月JOURNALOFSOUTHCHINANORMALUNIVERSITY第44卷第2期May2012(NATURALSCIENCEEDITION)Vol．44No．2文章编号:1000－5463(2012)02－0080－05左金丸及类方的HPLC指纹图谱研究1，221*13邓桂明，王朝润，张鹤鸣，刘颂豪，杨立平(1．华南师范大学生物光子学研究院，国家中医药管理局中医药与光子技术三级实验室，广东广州510631;2．湖南中医药大学第一附属医院，湖南长沙410007;3．湖南省肿瘤医院

2、，湖南长沙410013)摘要:建立左金丸及其类方的HPLC指纹图谱．用RP－HPLC法，乙腈(A)－水(B)(含0．06%冰醋酸，10mmol/L醋酸铵)为流动相，梯度洗脱，并对其相似度比较分析．研究结果表明:配伍比例的不同可导致物质基础存在显著差异性．为左金丸及其类方的质量控制提供依据．关键词:左金丸;指纹图谱;高效液相中图分类号:R286文献标志码:Adoi:10．6054/j．jscnun．2012．05．018左金丸记载于《丹溪心法·火六》，为辛开苦降盐酸药根碱(批号:0733－9230);盐酸巴马汀(批的代表方剂，

3、由黄连、吴茱萸按6∶1比例组成，具有号:0732－9002);吴茱萸次碱(批号:110801－清肝泻火，降逆止呕功效等功效．后世受其启发，根201006);绿原酸(批号:110753－200413)均购自中据黄连、吴茱萸的不同比例组成的左金丸类方如反国药品生物制品检定所．左金丸(16∶)、甘露散(21∶)、茱萸丸(11∶)，分别主治胃乙腈(色谱纯，批号:20090522，天津市科密欧化［1］寒证、暑气证和寒痢证．本研究通过建立左金丸学试剂有限公司);甲醇(色谱纯，批号:20100805，及其类方的HPLC指纹图谱，观察各指纹

4、HPLC图上海陆都化学试剂厂);冰醋酸(分析纯，批号:谱中共有峰数目、相对保留时间、相对峰面积比值、20070727，湖南汇虹试剂有限公司);其它试剂为分相似度等技术参数，对左金丸及其类方的HPLC指析纯;水为超纯水．纹图谱进行比较分析，考察其配伍比例对组方化学1．3色谱条件成分和含量变化的影响，为研究左金丸及其类方的色谱柱:AgilentTC－C18(4．6mm×200mm，5质量控制提供分析方法和理论依据．μm);柱温:25℃;流动相:乙腈(A)－水(B)(含0．06%冰醋酸，10mmol/L醋酸铵)，依下列程序梯1材料

5、与方法度洗脱0～27min4%～21．5%(A的质量分数，下同)，27～40min21．5%(A)，40～75min21．5%1．1仪器～32%(A)，75～85min32%～60%(A)，85～95Agilent1200高效液相色谱仪(VWD检测器)min60%～4%(A);流速:0．8mL/min;检测波长:(美国安捷伦科技有限公司);AL－204型电子分析335nm，进样量10μL．天平(大连梅特勒托利多有限公司);SK3300A型超1．4供试液制备［2－5］声清洗器(上海科导超声仪器有限公司);AP－01F1．4．1

6、供试品溶液的制备按质量比精密称型真空泵(天津奥特赛恩斯仪器有限公司);TD5A取黄连∶吴茱萸(1∶0，1∶1，1∶6，6∶1，2∶1，0∶1)细－WS台式低速离心机(湖南湘仪实验室仪器开发粉(＜0．15mm)4.2000g，混匀，加25倍量重蒸馏有限公司)水，用1mol/LHCl调至pH2.0，浸泡30min，37℃1．2药物及试剂水浴回流提取1.5h，离心(4000r/min)15min，过对照品盐酸小檗碱(批号:110713－200609);滤;残渣加25倍量重蒸馏水，以1mol/LNaOH调至收稿日期:2011－11－

7、12基金项目:湖南省科技计划项目(2009FJ3139);湖南省中医药管理局资助项目(2010072)*通讯作者，zhang_heming88@yahoo．cn第2期邓桂明等:左金丸及类方的HPLC指纹图谱研究81pH9.0，37℃水浴回流提取1h，离心(4000r/min)性．结果各共有指纹峰的相对保留时间RSD＜15min，过滤，合并2次滤液，浓缩并定容至100mL，0.50%、相对峰面积RSD＜3.0%，测得共有峰的指精密移取1mL并用重蒸馏水定容至10mL，0．45纹图谱相似度＞0．98，表明供试品溶液在24h内稳μ

8、m微孔滤膜滤过即得各供试品溶液．定性良好．1．4．2对照品溶液的制备精密称取盐酸药根碱、1．5．3精密度试验取同一批茱萸丸供试品溶液盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、吴茱萸次碱、绿原酸对照(黄连∶吴茱萸1∶1)，连续进样6次，考察色谱峰的品各1．7、2．9、16.0、3.2、5.0mg，分别置于10