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《鳖甲炮制前后抗肝纤维化有效物质部位hpce指纹图谱的比较研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、鳖甲炮制前后抗肝纤维化有效物质部位HPCE指纹图谱的比较研究论文.freel×57cm未涂层石英毛细管,运行缓冲液为20mmol/L磷酸氢二钠-100mmol/L三羟甲基氨基甲烷(lmol/LNaOH调pH值至12.0),分离电压为18kV,检测波长为254nm,柱温为20℃,.freelethodegeographicaloriginofpre-and-post-processedTrionyxsinensiscarapaceinanti-liverfibrosis,10crudesamplesand10vinegar-processedethodequippe
2、dn(75μm×57cm),mol/LNa2HPO4-100mmol/LTris(pH＝12)asbackgroundelectrolyte,UVdetectorat254nm,voltageof18kVanddetectiontemperatureof20℃.ResultsSeventeenco-possessingpeaksples,thesimilarityofthefingerprintples,thesimilarityofthefingerprintilaritybetplesandthecontrastfingerprintofvinegar-pro
3、cessedsamplesdroppedto0.86～0.92,sodidthesimilaritybetplesandthecontrastfingerprintofcrudesample,droppedto0.86～0.93.ConclusionThecontentofTrionyxsinensiscarapaceappearstochangegreatlybeforeandaftervinegarprocessing,andsomeneergedafterprocessing.Keyann)的背甲,始载于《神农本草经》,收载于历年版《中华人民共和国药典》,具
4、有滋阴潜阳、软坚散结、退热除蒸的功效1,是临床用于治疗肝纤维化疾患的常用中药,多采用醋制鳖甲入药2。中医理论认为,生鳖甲养阴清热、潜阳熄风之力较强,用于热病伤阴或内伤虚热、虚风内动等证；鳖甲砂炒醋淬后,质地酥脆,能增强入肝消积、软肝散结的作用.本试验室前期对鳖甲抗肝纤维化的有效物质进行了初步研究,将醋鳖甲提取物用透析膜分为分子量小于7000和分子量大于7000的2个物质部位。药理试验结果表明,鳖甲提取物中的肽类物质(分子量小于7000)具有明显抗肝纤维化的作用3；并采用高效毛细管电泳(HPCE)分析方法,建立了鳖甲抗肝纤维化有效物质部位的指纹图谱,其色谱峰清晰、相
5、似度良好,且方法可靠性强4。为了探讨鳖甲炮制前后化学成分的变化,本研究分别测定了生鳖甲与醋鳖甲抗肝纤维化有效物质部位的HPCE指纹图谱,对其炮制前后的指纹图谱进行了分析比较。1仪器与试药BeckmanP/Asystem5000型HPCE仪(美国Beckman公司),融熔石英毛细管柱(75μm×57cm,有效长度49cm,河北永年锐沣色谱器件有限公司),冷冻干燥机FD-1A-50(北京博医康实验有限公司),KQ-250B超声波清洗器,78-1型磁力加热搅拌器,万分之一分析天平(METTLERTOLEDOAL204),828型奥立龙pH计,透析膜(GREENBIRD,
6、截留分子量7000)。三羟甲基氨基甲烷(Tris)为优级纯,水为双蒸水,磷酸氢二钠、氢氧化钠为分析纯。鳖甲药材由浙江衢化医院提供,均来源于浙江衢化地区,其中10批醋鳖甲分别由10批生鳖甲按照《中华人民共和国药典》1方法炮制而成。2方法与结果2.1供试品溶液的制备称取生鳖甲粉末25.0g,加200mL水超声提取20min,抽滤,残渣加水100mL超声10min,抽滤,合并滤液,冷冻干燥得冻干粉,用少量水溶解置于透析膜内,膜外溶液为纯水约200mL,透析2次,每次5h,合并膜外溶液,冷冻干燥。精密称取冻干粉加水配制成浓度为5.0mg/mL的溶液,经0.22μm滤膜过滤
7、,作为供试品溶液；照生鳖甲供试品溶液同法制成醋鳖甲供试品溶液。2.2对照品溶液和有效组分对照溶液的制备将本实验室从鳖甲抗肝纤维化的有效物质部位中分离得到的活性五肽“HGRFG”,配制浓度为0.1mg/mL的水溶液,作为对照品溶液；将本实验室经柱色谱分离和药理筛选得到的活性组分肽Bj4,配制浓度为0.1mg/mL的水溶液,作为有效组分对照溶液。2.3色谱条件未涂层石英毛细管75μm×57cm,有效长度49cm；检测波长：254nm；压力进样：5kPa,5s；分离电压：18kV；柱温：20℃；运行缓冲液：20mmol/L磷酸氢二钠-100mmol/L三羟甲基氨基甲烷(
8、1mol/
