【硕士论文】二妙丸类方抗湿热证痛风物质基础相关性研究.pdf

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1、南京中医药大学硕士学位论文摘要为探索类方方剂配伍物质基础变化特征，研究二妙丸类方(二妙丸、三妙丸、四妙丸及加昧四妙丸)抗湿热证痛风物质基础的关联性，本文以二妙丸为基础方，测定二妙丸类方抗湿热证痛风有效部位群指纹图谱，比较指纹图谱共有峰成分特征及配伍变化；统计分析有效部位与药效指标的相关性；用相关、回归、模糊聚类等统计方法对指纹图谱共有峰与药效结果进行逻辑关联分析，确定二妙丸类方效应物质基础，探讨分析二妙丸类方抗湿热证痛风物质基础的相关性，探索中医类方方剂效应物质基础及配伍规律的研究途径。本论文主要研究内容如下：首先，制备二妙丸类方与组方药有效部位(生物碱、黄酮

2、、挥发油、有机酸、苷、水液)群，并通过正交设计组合组方药部位，制备大量样本的供试品；建立加味四妙丸有效部位群指纹图谱，并测定二妙丸类方及供试品的HPLC、GC的四个指纹图谱，确定共有峰。其次，利用组方药及其有效部位以及紫外光谱图对比，确定指纹图谱共有峰的成分特征、共有峰组方药及有效部位的归属；通过对照品对比以及HPLC．MS、GC．GC对指纹图谱共有峰进行定性分析，从而表征二妙丸类方的物质基础。最后，采用多元回归分析的强迫进入法(enter)和逐步回归法(stepwise)、相关分析计算pearson相关系数以及聚类分析的方法，将二妙丸类方有效部位群及组合有效

3、部位样品的药效数据和指纹图谱共有峰面积进行了相关性统计分析，优选对药效有显著影响的指纹图谱共有峰；通过比较二妙丸类方的HPLC图谱、挥发油GC图谱以及水液部位乙酰化GC图谱，探讨了配伍对二妙丸类方的成分及效应的影响。采用模糊聚类的统计分析方法对二妙丸类方的指纹图谱中有效色谱峰成分及药效进行聚类分析，探讨二妙丸类方抗湿热证痛风效应物质基础的关联性。结合药效数据，通过方差分析、多元回归和相关分析以及模糊聚类等统计方法，筛选出了对药效有显著影响的有效部位、共有峰等并确定了类方间的相关性，尝试了一种复方物质基础研究的模式。通过有效部位群的指纹图谱与抗炎、镇痛、降尿酸以

4、及对HUVEC(尿酸盐诱导的血管内皮细胞)损伤的保护作用等药效相关性研究，得出生物碱、苷、水液部位在抗炎、镇痛、降尿酸上都有明显的作用，挥发油在抗炎和HUvEC增长抑制率上作用明显，有机酸、黄酮部位对药效有一定的提高作用，已鉴定出的主要成分是异绿原酸a,b，丁香酸，2．(8．甲基．2，8．二羟基一2一羟甲基双环【5．3．O】葵．7．基)．异丙醇葡萄糖苷，断马钱子苷二甲基缩醛，木犀草苷、绿原酸异构体、阿魏酸、绿原酸、木兰花碱、紫堇定，东莨菪Il摘要碱、蝙蝠葛任碱，茵芋碱，(2R,3R)．花旗松素．3’．O．p．D．吡喃鼠李糖苷、紫丁香苷、盐酸药根碱、落新妇苷、新

5、落新妇苷、巴马汀、小檗碱、异落新妇苷、新异落新妇苷、2．(1，40【．二甲基-2，3．二羟基．十氢莱．7．基)．异丙醇葡萄糖苷，马钱子苷，竹节人参皂昔I，Ⅳ、7．苯基．2．庚烯-4，6．二炔．1．醇、13一芹子烯、B．桉叶油醇、苍术醇、a．甜没药萜醇、4，11．桉叶二烯、Y一桉叶油醇、B．倍半水芹烯、1，4．二甲基．3．(2．甲基．1．烯丙基>-4-乙烯基．1．环辛烯、榄香醇、Y．榄香烯、3．蒈烯等。由黄柏和苍术组成的二妙丸的物质基础由生物碱、挥发油、苷类以及水液部位(糖类成分)组成，对抗炎、镇痛、降尿酸、HUVEC增长抑制率都有明显的作用；随着主要含有苷成分

6、的牛膝加入，三妙丸在药效方面要优于二妙丸；随着薏苡仁的加入，四妙丸在抗炎和HUVEC损伤的保护方面要优于三妙丸；而土茯苓和忍冬藤的加入使加昧四妙丸的药效有着明显的增加。说明在基础方二妙丸基础上加减形成的类方物质基础与抗湿热证痛风效应有共性与差异。结论：二妙丸及其类方有共同的物质基础，从基础方到各类方，抗湿热证痛风物质基础的配伍变化具有关联性。关键词：二妙丸类方，指纹图谱，物质基础，统计分析，逻辑关联III南京中医药大学硕士学位论文AbstractTostudythecorrelationofthematerialfoundationofonAnti—Damp-

7、Heat-SyndromeGoutofErmiaoWancategorizedformulas(ErmiaoWan,SanmiaoWan,SimiaoWanandmodifiedSimiaowan)andtoexploreitscharacteristicschanges，thethesistakeErmiaoW觚asthebasicformula,determinethefingerprintoftheeffectivepartsofErmiaoWancategorizedformulasinanti-goutysyndromeofdampandhe巩com

8、parethecompositionf