欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:26230973
大小:53.50 KB
页数:6页
时间:2018-11-25
《退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及caspase》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及Caspase【摘要】目的探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。方法采用原位DNA片段末端标记和免疲组织化学方法,对比观察57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达。结果57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞凋亡率(AI)为54.0%,Caspase-8蛋白阳性细胞百分率为43.0%;42例创伤对照颈椎间盘AI为39.6%,Caspase-8蛋白阳性细胞百分比为35.4%。两组间AI、Caspas
2、e-8蛋白表达差异均有显著性意义(P<0.05)。Caspase-8表达越强,凋亡细胞数越多。结论Caspase-8蛋白参与了颈椎间盘组织中细胞调亡的调节,可能在颈椎病颈椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用。【关键词】颈椎间盘;退行性变;细胞凋亡;Caspase-8 Abstract:ObjectiveToexplorethemechanismofcervicalintervertebraldiscdegeneration.MethodsTheapoptoticstatusandtheexpress
3、ionofCaspase-8in57casesofdegenerativecervicalintervertebaldisctissuesand42oftraumaticnormalcervicalintervertebaldisctissuesediateddUTP-biotinnickendlabeling(TUNEL)andimmunohistochemistrymethods.ResultsTheaverageapoptoticindex(AI)in57casesofdegenerativecer
4、vicalintervertehaldiscaticnormalcases(39.6)(P<0.05).TheexpressionratesofCaspase-8protEinin57casesofdegenerativecervicalintervertebaldiscaticnormalcases(35.4%)(P<0.05).ThestrongerCaspase-8protEInexpressed,thebiggertheapoptoticindexinaldeoxynucleotidyltrans
5、ferasemediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)和免疫组织化学方法对57例颈椎病退变颈椎间盘组织及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达进行研究,探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。 1材料与方法 1.1材料 颈椎间盘组织细胞(C3-C7)取自2006年5月至2007年9月本院骨科。实验组为经手术治疗的脊髓型颈椎病患者,标本来源于脊髓型颈椎病患者前路手术所取得的椎间盘组织共57例,男34例,女23例,年龄46
6、~74岁。均经术后病理检查证实为退变椎间盘组织的脊髓型颈椎病患者。对照组为经手术治疗的颈椎创伤患者,伤前无腰腿痛病史,标本来源于颈椎创伤患者前路手术所取得的椎间盘组织共42例,男31例,女11例,年龄16~38岁,术后病理检查证实为无明显退行性改变椎间盘组织。 1.2方法 1.2.1脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法 参照Gavrieli[1]进行TUNEL法检测细胞凋亡,细胞核中有棕色颗粒者为阳性细胞,即凋亡细胞。每例在400倍镜下,随机观察计数6个视野,记录阳性细胞数,以平均100个细
7、胞核中含凋亡细胞个数为凋亡率(apopoticindex,AI)。 1.2.2免疫组织化学染色法 一抗为兔抗人Caspase-8多克隆抗体,为武汉博士德公司产品。所有标本均在同一条件下采用链霉亲和素蛋白—过氧化物酶连接法(SABC)进行免疫组织化学染色,一抗稀释度为1∶100,各步骤间均用PBS洗片。阳性对照选用经病理诊断为退变椎间盘的病理石蜡切片,用PBS代替一抗为阴性对照。细胞核出现棕黄色颗粒为染色阳性细胞,每例切片双盲法计数,在400倍镜下,随机观察计数6个视野,记录阳性细胞率,即6个视野内阳性
8、细胞总数/6个视野内细胞总数×100%。 1.3统计学方法 采用卡方检验。 2结果 2.1颈椎间盘组织细胞凋亡情况根据TUNEL法,检测颈椎间盘组织中阳性染色细胞的结果(如图1、2,见封4),细胞凋亡率颈椎病退变组明显高于创伤对照组,见表1。表1创伤对照与颈椎病退变颈椎间盘组织中的细胞凋亡(略) 2.2创伤对照与颈椎病退变颈椎间盘组织细胞中Caspase-8蛋白表达情况颈椎间盘组织中Caspase-8蛋白表达部分在椎
此文档下载收益归作者所有