退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及caspase

《退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及caspase》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及Caspase【摘要】目的探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。方法采用原位DNA片段末端标记和免疲组织化学方法，对比观察57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达。结果57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞凋亡率(AI)为54.0%，Caspase-8蛋白阳性细胞百分率为43.0%；42例创伤对照颈椎间盘AI为39.6%，Caspase-8蛋白阳性细胞百分比为35.4%。两组间AI、Caspas

2、e-8蛋白表达差异均有显著性意义(P＜0.05)。Caspase-8表达越强，凋亡细胞数越多。结论Caspase-8蛋白参与了颈椎间盘组织中细胞调亡的调节，可能在颈椎病颈椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用。【关键词】颈椎间盘；退行性变；细胞凋亡；Caspase-8　　　Abstract:ObjectiveToexplorethemechanismofcervicalintervertebraldiscdegeneration.MethodsTheapoptoticstatusandtheexpress

3、ionofCaspase-8in57casesofdegenerativecervicalintervertebaldisctissuesand42oftraumaticnormalcervicalintervertebaldisctissuesediateddUTP-biotinnickendlabeling(TUNEL)andimmunohistochemistrymethods.ResultsTheaverageapoptoticindex(AI)in57casesofdegenerativecer

4、vicalintervertehaldiscaticnormalcases(39.6)(P＜0.05).TheexpressionratesofCaspase-8protEinin57casesofdegenerativecervicalintervertebaldiscaticnormalcases(35.4%)(P＜0.05).ThestrongerCaspase-8protEInexpressed，thebiggertheapoptoticindexinaldeoxynucleotidyltrans

5、ferasemediateddUTPnickendlabeling，TUNEL)和免疫组织化学方法对57例颈椎病退变颈椎间盘组织及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达进行研究，探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。　　1材料与方法　　1.1材料　　颈椎间盘组织细胞(C3-C7)取自2006年5月至2007年9月本院骨科。实验组为经手术治疗的脊髓型颈椎病患者，标本来源于脊髓型颈椎病患者前路手术所取得的椎间盘组织共57例，男34例，女23例，年龄46

6、～74岁。均经术后病理检查证实为退变椎间盘组织的脊髓型颈椎病患者。对照组为经手术治疗的颈椎创伤患者，伤前无腰腿痛病史，标本来源于颈椎创伤患者前路手术所取得的椎间盘组织共42例，男31例，女11例，年龄16～38岁，术后病理检查证实为无明显退行性改变椎间盘组织。　　1.2方法　　1.2.1脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法　　参照Gavrieli［1］进行TUNEL法检测细胞凋亡，细胞核中有棕色颗粒者为阳性细胞，即凋亡细胞。每例在400倍镜下，随机观察计数6个视野，记录阳性细胞数，以平均100个细

7、胞核中含凋亡细胞个数为凋亡率(apopoticindex，AI)。　　1.2.2免疫组织化学染色法　　一抗为兔抗人Caspase-8多克隆抗体，为武汉博士德公司产品。所有标本均在同一条件下采用链霉亲和素蛋白—过氧化物酶连接法(SABC)进行免疫组织化学染色，一抗稀释度为1∶100，各步骤间均用PBS洗片。阳性对照选用经病理诊断为退变椎间盘的病理石蜡切片，用PBS代替一抗为阴性对照。细胞核出现棕黄色颗粒为染色阳性细胞，每例切片双盲法计数，在400倍镜下，随机观察计数6个视野，记录阳性细胞率，即6个视野内阳性

8、细胞总数/6个视野内细胞总数×100%。　　1.3统计学方法　　采用卡方检验。　　2结果　　2.1颈椎间盘组织细胞凋亡情况根据TUNEL法，检测颈椎间盘组织中阳性染色细胞的结果(如图1、2，见封4)，细胞凋亡率颈椎病退变组明显高于创伤对照组，见表1。表1创伤对照与颈椎病退变颈椎间盘组织中的细胞凋亡（略）　　2.2创伤对照与颈椎病退变颈椎间盘组织细胞中Caspase-8蛋白表达情况颈椎间盘组织中Caspase-8蛋白表达部分在椎