退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及Caspase-8表达的研究.doc

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1、退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及Caspase-8表达的研究【摘要】目的探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。方法采用原位DNA片段末端标记和免疲组织化学方法，对比观察57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达。结果57例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞凋亡率(AI)为54.0%，Caspase-8蛋白阳性细胞百分率为43.0%；42例创伤对照颈椎间盘AI为39.6%，Caspase-8蛋白阳性细胞百分比为35.4%。两组间AI、Caspase-

2、8蛋白表达差异均有显著性意义(P＜0.05)。Caspase-8表达越强，凋亡细胞数越多。结论Caspase-8蛋白参与了颈椎间盘组织中细胞调亡的调节，可能在颈椎病颈椎间盘退行性变发生和发展中发挥重要作用。【关键词】颈椎间盘；退行性变；细胞凋亡；Caspase-8　　　Abstract:ObjectiveToexplorethemechanismofcervicalintervertebraldiscdegeneration.MethodsTheapoptoticstatusandtheexpressionofCaspas

3、e-8in57casesofdegenerativecervicalintervertebaldisctissuesand42oftraumaticnormalcervicalintervertebaldisctissuesweredetectedwithTdT-mediateddUTP-biotinnickendlabeling(TUNEL)andimmunohistochemistrymethods.ResultsTheaverageapoptoticindex(AI)in57casesofdegenerativece

4、rvicalintervertehaldiscwas54.0%，whichwassignificantlyhigherthanthatof42traumaticnormalcases(39.6)(P＜0.05).TheexpressionratesofCaspase-8proteinin57casesofdegenerativecervicalintervertebaldiscwere43.0%，whichwassignificantlyhigherthanthoseof42traumaticnormalcases(35.

5、4%)(P＜0.05).ThestrongerCaspase-8proteinexpressed，thebiggertheapoptoticindexwas.ConclusionCaspase-8takepartintheoccurrenceandprogressionofcervicalintervertebaldiscdegeneration.　　Keywords:cervicalintervertebraldisc;degeneration;apoptosis;caspase-8细胞凋亡是生物体调节组织自稳的生理过程

6、，依赖一类对天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶(caspases)产生的级联反应。Caspase-8是死亡受体介导的凋亡途径中关键的启动子，能够通过寡聚而自身切割活化，并能激活下游Caspase，产生凋亡效应。Caspase-8基因甲基化、基因突变及其它表达异常可导致细胞凋亡和增殖失调，从而参与某些疾病的发生。近年来有关细胞凋亡及凋亡相关蛋白在退变性疾病的发生及进展中所起作用越来越受到人们重视。本研究采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminaldeoxynucleotidyltransferase4medi

7、ateddUTPnickendlabeling，TUNEL)和免疫组织化学方法对57例颈椎病退变颈椎间盘组织及42例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及凋亡相关蛋白Caspase-8的表达进行研究，探讨凋亡相关蛋白Caspase-8在颈椎间盘退变中的作用。　　1材料与方法　　1.1材料　　颈椎间盘组织细胞(C3-C7)取自2006年5月至2007年9月本院骨科。实验组为经手术治疗的脊髓型颈椎病患者，标本来源于脊髓型颈椎病患者前路手术所取得的椎间盘组织共57例，男34例，女23例，年龄46～74岁。均经术后病理检查证实为退变椎

8、间盘组织的脊髓型颈椎病患者。对照组为经手术治疗的颈椎创伤患者，伤前无腰腿痛病史，标本来源于颈椎创伤患者前路手术所取得的椎间盘组织共42例，男31例，女11例，年龄16～38岁，术后病理检查证实为无明显退行性改变椎间盘组织。　　1.2方法　　1.2.1脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法　　参照G