资源描述：
《退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及TRAIL表达的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、退变颈椎间盘组织中细胞凋亡及TRAIL表达的研究作者：锁志刚,王庆锋,丁惠强【摘要】目的探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumornecroticfactor-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)在颈椎间盘退变中的作用。方法采用原位DNA片段末端标记(TUNEL)法和免疫组织化学方法，对比观察30例颈椎病退变颈椎间盘组织细胞及30例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及TRAIL的表达。结果TUNEL染色观察示颈椎病组的髓核内的平均凋亡细胞率为(10.93±1.87)%，高于对照组的(6.43±1.56)%(P&
2、lt;0.01)。SP免疫组织化学染色示颈椎病组髓核内TRAIL染色阳性细胞率为(49.13±15.66)%，高于对照组的(20.26±2.81)%，差异有统计学意义(P<0.01)。将对照组和颈椎病组全部60例颈椎间盘标本合并后进行Pearson相关分析,颈椎间盘髓核内TRAIL染色阳性细胞率与TUNEL阳性细胞率之间呈正相关，相关系数r=0.921(P<0.01)。结论颈椎病椎间盘组织细胞凋亡数与TRAIL阳性细胞数均明显高于创伤对照组，且凋亡与TRAIL的表达呈正相关。【关键词】颈椎间盘;退行性变;细胞凋亡;TRAIL9 现阶段，临
3、床治疗颈椎病的方法包括药物、颈椎牵引制动和手术切除病变颈椎间盘或颈椎管成形，这些方法均是为了解除突出颈椎间盘对颈部脊髓、神经或血管的压迫，并非针对颈椎间盘退变本身，而且经手术切除病变椎间盘并融合相应脊柱节段后往往造成相邻椎间盘的加速退变甚至突出[1]。因此，为阻止颈椎病的发生发展，有必要从颈椎间盘退变这一环节实施干预。大量的研究显示,椎间盘退变与椎间盘细胞凋亡有关，退变椎间盘中椎间盘细胞凋亡机制仍然未阐明。本研究对30例颈椎病退变颈椎间盘组织及30例创伤对照颈椎间盘组织细胞凋亡状态及髓核组织中TRAIL的表达进行观察，探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
4、(tumornecroticfactor-relatedapoptosis-inducingligand,TRAIL)凋亡途径在颈椎间盘退变中的作用。 1材料与方法 1.1取材及分组颈椎间盘组织(C3-C7)取自2007年5月-2009年1月本院骨科。标本分为2组:颈椎病组为经手术治疗的脊髓型颈椎病患者,标本来源于脊髓型颈椎病患者经前路手术所取得的椎间盘组织共30例,9男24例,女6例,年龄46～74岁。均经术后病理检查证实为退变椎间盘组织。对照组为经手术治疗的颈椎创伤患者,伤前无颈、肩痛病史,标本来源于颈椎创伤患者前路手术所取得的椎间盘组织共3
5、0例,男29例,女1例,年龄16～38岁,术后病理检查证实为无明显退行性改变椎间盘组织。所取标本均为髓核组织,生理盐水冲洗血迹,送往病理科石蜡包埋。 1.2方法 1.2.1原位DNA片断末端标记参照Gavrieli[2]的方法进行终末核苷酸转移酶(TdT)介导的dUTP原位末端标记(terminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddUTPnickendlabeling,TUNEL)法检测细胞凋亡,细胞核中有棕色颗粒者为阳性细胞,即凋亡细胞。每例在400倍镜下,随机观察计数10个视野,记录阳性细胞数,以平均10
6、0个细胞中含凋亡细胞个数为凋亡指数(apopoticindex,AI)。 1.2.2SP免疫组织化学染色一抗为兔抗人TRAIL多克隆抗体,为北京博奥森公司产品。所有标本均在同一条件下按照美国ZYMED公司即用型超敏SP-0023免疫组织化学试剂盒说明操作，一抗稀释度为1∶100,各步骤间均用PBS洗片。阳性对照选用经病理诊断为宫颈癌的病理石蜡切片,用PBS代替一抗为阴性对照。细胞浆出现棕黄色颗粒为染色阳性细胞,每例切片双盲法计数,在400倍镜下,随机观察计数10个视野,记录阳性细胞率,即10个视野内阳性细胞总数/10个视野内细胞总数×100%。
7、1.3统计学方法采用SPSS12.09统计软件进行分析。数据以均数±标准差表示，两样本均数的比较采用独立样本t检验，相关分析采用Pearson相关分析，P<0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1TUNEL染色 对照组颈椎间盘髓核内细胞较多，可见散在分布的TUNEL染色阳性细胞。颈椎病组髓核内细胞稀疏，可见细胞胞核棕黄着色并伴染色质边集的TUNEL染色阳性细胞。颈椎病组髓核内凋亡细胞率明显高于对照组，两组间比较差异有统计学意义(见表1)。表1对照组和患者组颈椎间盘髓核内TUNEL、TRAIL阳性细胞率的比较 2.2SP免疫组织化学染
8、色 对照组髓核内细胞较多，可见散在分布于软骨陷窝内的胞浆棕黄着色细胞，着色浅，胞膜皱缩，TRAIL阳性细胞
