trail在正常椎间盘细胞中的分布及表达论文

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1、TRAIL在正常椎间盘细胞中的分布及表达论文【摘要】目的了解肿瘤坏死因子超家族成员TRAIL在正常椎间盘不同部位中的表达及TRAIL/DR4诱导的细胞凋亡情况。方法将31个包括髓核、纤维环及软骨终板的正常椎间盘组织制成石蜡标本后切片，免疫组化方法检测TRAIL的表达，计算阳性细胞所占的百分比。结果在髓核、纤维环及软骨终板中存在TRAIL的表达，其中髓核中TRAIL表达高于纤维环及软骨终板，纤维环中表达最低，差异有显著性（F=23.51,q＝3.190～9.526，P0.05）。结论TRAIL在正常椎间盘组织的

2、不同部位存在着区域性分布，在正常椎间盘组织中可能存在着由TRAIL/DR4诱导的第3种凋亡途径。【关键词】细胞凋亡椎间盘肿瘤坏死因子［ABSTRACT］ObjectiveTodeterminethedistributionpatternoftumornecrosisfactorsuperfamilymemberTRAILinnormalintervertebraldisc.MethodsSamplesofnormalintervertebraldisctissuesincludingnucleus,annul

3、usandendplate(n=31)munohistochemicalstainingicroscopically.ResultsExpressionofTRAILalintervertebraldisctissueexhibitsaspecialdistributionpattern,suggestingthattheapoptosisinnormaldiscsmayfolloediatedpathornecrosisfactors腰椎间盘退行性变发病原因有多种.freel。1.2TRAIL检测采用免疫组

4、化DAB染色方法。石蜡切片脱蜡至水，用蒸馏水新鲜配制体积分数0.02H2O2室温孵育10min，以消除内源性过氧化物酶的活性。在温度为93～98℃、pH6的柠檬酸缓释液中进行抗原修复20min，体积分数0.05正常山羊血清（PBS稀释）室温放置20min封闭非特异性抗原，滴加适当比例（1∶50）稀释的一抗TRAIL(SantaCruzBiotechnology,SantaCruz,Calif,USA)，4℃过夜。滴加1～3滴第二代生物素标记二抗工作液，室温孵育20min。滴加第二代辣根过氧化物酶标记链霉卵白素

5、工作液，室温孵育20min。DAB显色，苏木精轻度复染，脱水、透明、封片。1.3结果观察及数据处理对每个椎间盘的3个不同部分（髓核、纤维环、软骨终板）分别进行观察分析。DAB显色结果显示：TRAIL抗体染色的阳性细胞胞浆呈黄褐色，细胞核呈蓝色，而阴性细胞核呈蓝色，胞浆不显色。从每张切片的3个不同部位中（髓核、纤维环、软骨终板）取5～10个高倍镜视野（400倍），计数阳性细胞数及细胞总数，计算阳性细胞所占的百分比。使用SAS软件进行数据处理及统计学分析。2结果椎间盘标本的髓核、纤维环及软骨终板中均有TRAIL表

6、达，其阳性率分别为（18.23±4.85）%、（9.51±4.19）%、（12.43±6.07）%。髓核组织中TRAIL表达高于纤维环及软骨终板，纤维环中表达最低，差异有显著性(F=23.51,q＝3.190～9.526，P0.05）。3讨论细胞表面的凋亡受体是属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）家族的跨膜蛋白，它们包括Fas（Apo1/CD95）、TNFR1、DR3/ONTAJ,.freeloleculareventsinintervertebraldiscdegeneration:implicationsf

7、ortherapy［J］.Pathol，2002，196:374379.［2］HORNERHA,URBANJP.Effectofnutrientsupplyontheviabilityofcellsfromthenucleuspulposusoftheintervertebraldisc［J］.Spine,2001，26:25432549.［3］BUCK］.Lippincott,etal.Metabolismoftheintervertebraldisc:effectsofloetabolismofbov

8、inenucleuspulposuscells［J］.Spine，2005,30(5):487496.［12］BIBBYSR,UrbanJP.Effectofnutrientdeprivationontheviabilityofintervertebraldisccells［J］.EurSpine,2004,13(8):695701.［13］BIBBYSR,JONESDA,LEERB,etal.