细胞角蛋白在正常皮肤组织中的表达

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1、细胞角蛋白在正常皮肤组织中的表达作者：孙莉，李红，刘淑梅，徐志秀【摘要】目的观察7种细胞角蛋白（cytokeratins，CK）在正常皮肤组织的表达，并探讨其意义。方法应用免疫组织化学S-P法对20例不同部位的正常皮肤组织进行CK7（K72.2）、CK8（C-51）、CK10（DE-K10）、CK14（LL002）、CK17（E3）、CK18（DC10）、CK19（KS19.1）标记，观察不同细胞角蛋白的表达情况。结果在正常皮肤上皮组织中，7种细胞角蛋白的表达和分布有所不同。结论有选择地检测一组CK的联合表达，有助于各种皮肤上皮组织的识别。【关键词】细胞角蛋白；皮肤；免疫组织化学【Abst

2、ract】ObjectiveToobserveimmunohistochemicalexpressionofsevencytokeratinsonskinandtoassessitsdiagnosticvalue.MethodsImmunohistochemicalmarkers，includingCK7（K72.2），CK8（C-51），CK10（DE-K10），CK14（LL002），CK17（E3），CK18（DC10）andCK19（KS19.1）munohistochemicalstainingmethods.Theexpressionofcytokeratinsalskinep

3、ithelialtissuesof20cases.Conclusionprehensiveanalysisofaselectivecytokeratingroup，canassistdistinguishedofvariousskinepithelialtissues.【Keymunohistochemistry哺乳动物的细胞质含有复杂的细胞骨架蛋白，包括微丝、微管和中间丝。中间丝有细胞角蛋白Ⅰ、细胞角蛋白Ⅱ、结蛋白、波形蛋白、胶质纤维酸性蛋白、神经纤维等6种。上皮细胞胞质中的骨架蛋白除微丝（肌动蛋白）、微管蛋白外，主要是细胞角蛋白（cytokeratins，CK）。CK是上皮细胞的特征性

4、标记物，由生物化学和免疫学方法根据CK分子量的不同，分为20种，是一个庞大复杂的家族。不同类型的上皮细胞和同类型上皮细胞的不同分化阶段，表达不同的CK。当上皮组织发生瘤变甚至癌变后，仍然表达与正常组织基本相同的CK类型。皮肤的上皮性肿瘤，包括表皮和皮肤附属器肿瘤，类型繁多，组织形态复杂，有时鉴别诊断十分困难。研究不同CK在正常皮肤组织的表达，可能对表皮和皮肤附属器肿瘤的诊断具有一定价值。1材料与方法1.1材料所有正常皮肤的研究标本均来自胜利油田中心医院2003～2004年收检的病例，包括5例乳腺癌根治手术切除标本中远离肿瘤的胸部皮肤，5例直肠癌手术切除标本远离肿瘤的肛旁皮肤和10例不同部位

5、的色素痣切除标本的切缘皮肤。1.2试剂第一抗体为7种不同的细胞角蛋白单克隆抗体，包括CK7（K72.2）、CK8（C-51）、CK10（DE-K10）、CK14（LL002）、CK17（E3）、CK18（DC10）、CK19（KS19.1），均为工作液；免疫组织化学检测系统采用过氧化物酶标记的即用型UltraSensitiveTMS-P试剂盒；显色试剂为高敏感二氨基联苯胺（DAB）显色试剂盒。以上试剂购自福州迈新生物技术开发有限公司。1.3方法复查胜利油田中心医院2001～2004年收检的所有皮肤上皮性肿瘤病例的存档切片，从中选取所有皮肤附属器肿瘤及部分皮肤癌病例为研究对象。对存档蜡块重新

6、切片，进行免疫组织化学染色。抗原修复，CK7标记皮肤附属器肿瘤采用胰酶消化法，胰酶浓缩液和稀释液1∶3混匀，滴片后37℃孵育15min；CK8、CK10、CK14、CK17、CK18、CK19等6种抗体染色标记的切片，采用柠檬酸缓冲液高温高压法，高压锅内置pH6.0的0.01mmol/L柠檬酸缓冲液，加热至沸腾，放入切片，密闭高压锅继续加热，喷汽后2min停止。S-P法免疫组化标记，DAB显色。以PBS代替一抗做空白对照。1.4结果判定所有免疫组化染色结果在光镜下进行观察和评判。7种CK阳性表达位置均为细胞质。参照许良中等［1］的方法，综合考虑切片中阳性细胞占所观察同类细胞数的百分比和阳性

7、细胞着色强度两项标准，半定量判断结果。根据显色程度判断阳性强度，分为4级，无着色为阴性，记0分；浅黄色为弱阳性，记1分；棕黄色为中度阳性，记2分；棕褐色为强阳性，记3分。根据阳性细胞数量在观察的同类细胞中所占比例，分为4类，即阳性细胞≤2%为“个别”，记0分；阳性细胞数3%～20%为“少量”，记1分；21%～60%为“中量”，记2分；>60%为“大量”，记3分。综合评价值由两类记分分值的乘积表示，0～3分为（-），