藤茶总黄酮对人胃癌sgc

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1、藤茶总黄酮对人胃癌SGC作者：郑作文，郭成贤，毛健，谭为【摘要】　　目的探讨藤茶总黄酮的体外抗肿瘤作用。方法采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察藤茶总黄酮对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用。结果藤茶总黄酮能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长，MTT法IC50为20.71μg·ml-1；细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用；集落形成法，当药物浓度在9.90μg·ml-1以上时抑制率为100%，当药物浓度为6.60μg·ml-1时抑制率为69.80%，当药物浓度为4.

2、40μg·ml-1时抑制率为30.23%。结论藤茶总黄酮对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用。【关键词】藤茶总黄酮抗肿瘤作用SGC-7901细胞株　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheanti-tumoreffectofVineteaextractinvitro.MethodsThegroeasurementinthestomachcancercellSGC-7901.ResultsVineteaextractcouldobviouslyinhibitthegrol-

3、1;Vineteaextractcouldobviouslyaffectthetumorcellgroedicinedensityl-1,therepressiveratioincellcolonyassayedicinedensityl-1;therepressiveratioincellcolonyassayedicinedensityl-1.ConclusionVineteaextractcaninhibitthegrooreffect;SGC-7901；Cellline　　藤茶Ampelopsisgros

4、sedentata(Hand-Mazz)I-1640干粉(美国Gibco公司产品)；新生牛血清（杭州四季青公司产品，批号031101）；四甲基二氮唑蓝（北京拜尔迪生物公司分装，Amresco0793）；二甲基亚砜（博大泰克公司产品）；0.25%胰蛋白酶(美国HycloneLab公司产品)；注射用生理盐水(徐州莱恩药业公司产品，批号051122)。　　1.4仪器SUNRISE自动酶标仪(奥地利TECAN公司产品)；311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品)；DLF560型超净工作台(荷兰clearA

5、irTechniekbv公司产品)；细胞培养瓶(加拿大BIOFIL公司产品)；96孔板(上海Sunub科技发展公司产品)；倒置显微镜(广西梧州光学仪器厂产品)；微量移液器(法国Pipetman公司产品)；十万分之一电子天平(德国赛多利斯产品)。　　1.5培养液及试剂的配制RPMI-1640不完全培养液，不加血清的RPMI-1640培养液;RPMI-1640完全培养液，10%新生牛血清＋RPMI-1640不完全培养液。　　2方法与结果　　2.1SGC-7901细胞培养在长满SGC-7901细胞的培养瓶内加0.25%

6、胰酶，37℃消化3～4min，加培养液吹打，1∶3传代，3～5d长满。消化后计数，配制成10×104/ml细胞悬液，置37℃，5%CO2培养箱中培养备用。　　2.2MTT法测定［8，9］将SGC-7901细胞（1×105/ml）接种到96孔细胞培养板上，每孔190μl，并设空白对照组（只加RPMI1640完全培养液,不加细胞）。藤茶总黄酮8个剂量组分别加入不同浓度的藤茶总黄酮10μl/孔（终浓度分别为75.00，50.00，33.37，22.26，14.84，9.90，6.60，4.40μg·ml-1），每个浓度

7、均设4个复孔，同时设细胞对照孔（只加细胞和RPMI1640完全培养液，不加药物）。在37℃，5%CO2培养箱中培养48h，加入MTT（5mg·ml-1）10μl继续培养4h，弃上清，用RPMI-1640不完全培养液洗板2次，加入DMSO150μl，振荡10min,以酶标仪在550nm处测各孔吸光度值（OD），计算抑制率，用对数回归方程求出半数杀伤浓度（IC50）。肿瘤细胞生长抑制率按下式计算。　　肿瘤细胞生长抑制率（%）＝（1－实验组平均OD值/对照组平均OD值）×100%　　2.3生长曲线法测定［8，9］取对数

8、生长期的细胞，用10%新生牛血清的RPMI1640培养液配成1×104/ml的细胞悬液，接种于96孔培养板中，每孔190μl，空白对照组每孔加入10μl的RPMI-1640完全培养液。藤茶总黄酮5个剂量组分别加入终浓度分别为22.26，14.84，9.90，6.60，4.40μg·ml-1的藤茶总黄酮，10μl/孔，每个浓度均设4个复孔，对照组加入等体积的细胞培养液，置3