隐丹参酮抑制人胃癌sgc

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1、隐丹参酮抑制人胃癌SGC邓凤春1杨钰2赵红晔3王滨3周丽3沈云虹31.齐齐哈尔医学院解剖教研室，黑龙江齐齐哈尔161006；2.齐齐哈尔医学院第三附属医院医务科，黑龙江齐齐哈尔161006；3.齐齐哈尔医学院生理教研室，黑龙江齐齐哈尔161006[摘要]目的探讨隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法通过体外无菌传代培养2013年5月所购的人胃癌SGC-7901细胞，设空白对照组与20μm、40μm、60μm、80μm和100μm五个浓度的隐丹参酮组，分别于6h、12h、24h和48h后采用MTT法检测隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的抑

2、制率，并观察药物作用24h和48h后细胞的形态变化。结果①刺激6h和12h后，各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率均＜35%；刺激24h后，随着隐丹参酮浓度的递增，其对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率从33%逐渐增加至72%；刺激48h后，各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率均＞50%。②刺激24h后，隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的IC50为59.11μM，③与空白对照组相比，各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞均有抑制作用（P＜0.01），且除了20μM与40μM组及40μM与60μM组之间差异无统计学意义（P分别

3、为0.162和0.110），其余各组间差异有统计学意义（P＜0.05）。结论隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的增殖有明显的抑制作用，且有时间和剂量依赖关系；究其原因可能是隐丹参酮能够诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡，具体机制有待进一步研究。.jyqka公司产品。1.1.3主要仪器细胞培养瓶产自美国Corning公司；细胞培养板及针头滤器（孔径：0.2um）产自美国Costar公司；MR1812高速冷冻离心机产自法国Jouan公司；101-1AB型电热鼓风干燥箱产自天津市泰新特仪器有限公司；UV-2550UV-visiblespeetrophotom

4、eter，SHIMADZUCorporationAssembledinChina；倒置显微镜（IMT-2）产自Olympus公司；超净工作台产自苏州安泰空气技术有限公司；5%CO2孵箱产自ThermoElectronCorporation。1.2方法1.2.1药液配制隐丹参酮用DMSO配成一定浓度的储备液，过滤除菌，分装冻存，临用再前用培养液稀释成所需浓度（药物作用于细胞时，DMSO的终浓度小于或等于0.1%（v/v），该浓度对细胞生长无影响）。1.2.2隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞存活率的影响采用MTT法比色法：取96孔培养板，边缘的孔内加PB

5、S缓冲液填充，中间的孔作为实验观察孔。除调零孔不加细胞悬液外，其它各实验观察孔，调整细胞悬液浓度，取无菌传代培养第3~8代细胞，以1×104/孔的密度接种于孔板内，置于37℃、5%CO2细胞培养箱中培养。待细胞稳定生长4h后，设空白对照组和五个不同浓度的隐丹参酮组（终浓度设梯度为20、40、60、80、100μM），每种浓度5个复孔。除空白对照组外，每孔中加入相应浓度的隐丹参酮，分别刺激6h、12h、24h、48h后，加入0.5%MTT溶液，继续培养4h；小心吸去培养液；每孔加入150μlDMSO，置37℃、5%CO2细胞培养箱培养10min，使结晶物充

6、分溶解。在酶联免疫检测仪570nm/630nm测量各孔的吸光值。重复测定3次后，分别计算抑制率。抑制率=（对照组OD值-用药组OD值）/对照组OD值×100%。（注：每组去掉一个OD值最低值和一个最高值，取剩余三个复孔OD值来计算。）1.2.3细胞的形态学观察取对数生长的细胞，以5.0×105/孔的密度接种于6孔细胞培养板，设空白对照组和五个不同浓度的隐丹参酮组。待细胞密度长至70%~80%时，除空白对照组外，每孔中加入相应浓度的隐丹参酮，均于作用24h和48h后倒置显微镜下观察各组细胞形态变化。1.3统计方法所得数据用均数±标准差（x±s）表示，采用S

7、PSS13.0统计分析软件的One-TT比色法检测不同浓度的隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞存活率的影响，结果如表1所示。结果显示，隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞刺激6h和12h后，各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用并不明显，抑制率均低于35%；刺激24h后，各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用较明显，抑制率介于33%~72%之间；刺激48h后，各隐丹参酮组对人胃癌SGC-7901细胞的抑制作用明显，但最低浓度的隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的抑制率已超过50%。故选取24h作为隐丹参酮对人胃癌SGC-790

8、1细胞抑制作用的最佳时间。刺激24h后，隐丹参酮对人胃癌SGC-7901细胞的抑