藤茶总黄酮对人胃癌SGC7901细胞增殖抑制作用的实验研究

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1、藤茶总黄酮对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用的实验研究作者：郑作文，郭成贤，毛健，谭为【摘要】　　目的探讨藤茶总黄酮的体外抗肿瘤作用。方法采用MTT法、生长曲线法、细胞集落形成法观察藤茶总黄酮对人胃癌SGC-7901细胞抑制作用。结果藤茶总黄酮能明显抑制体外培养的SGC-7901细胞的生长，MTT法IC50为20.71μg·ml-1；细胞生长曲线法提示其对SGC-7901细胞的生长也有明显的抑制作用；集落形成法，当药物浓度在9.90μg·ml-1以上时抑制率为100%，当药物浓度为6.60μg·ml-1时抑制率为69.80%，当药物浓度为4.40μg·ml-1时抑制率为30

2、.23%。结论藤茶总黄酮对体外SGC-7901细胞的生长有明显的抑制作用。【关键词】藤茶总黄酮抗肿瘤作用SGC-7901细胞株　　Abstract：ObjectiveToinvestigatetheanti-tumoreffectofVineteaextractinvitro.MethodsThegrowthinhibitionwasanalyzedbyMTT,cellcolonyandcellgrowthcurvemeasurementinthestomachcancercellSGC-7901.ResultsVineteaextractcouldobviouslyinhibi

3、tthegrowthofculturedSGC-7901cells,theIC50inMTTassaywas20.71μg·ml-1;Vinetea9extractcouldobviouslyaffectthetumorcellgrowth.Theinhibitoryratioincellcolonyassaywas100%whenmedicinedensitywasover9.90μg·ml-1,therepressiveratioincellcolonyassaywas69.80%whenmedicinedensitywas6.60μg·ml-1;therepressiver

4、atioincellcolonyassaywas30.23%whenmedicinedensitywas4.40μg·ml-1.ConclusionVineteaextractcaninhibitthegrowthofSGC-7901invitro.　　Keywords：Vineteaextract;Anti-tumoreffect;SGC-7901；Cellline　　藤茶Ampelopsisgrossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄的嫩茎叶［1］。藤茶中含有大量黄酮类有效成分，用分光光度法对藤茶所含黄酮成分进行含量测定，以蛇

5、葡萄素为指标，藤茶中总黄酮的含量高达45.52%［2］。多项药理学研究表明，藤茶具有调节血糖和血脂、抗炎、抗氧化、抗病毒、抗肿瘤等作用［3～7］，其中抗肿瘤作用是近年来研究的热点。本研究对从藤茶提取分离得到的粉状淡黄色结晶进行抗人胃癌SGC-7901细胞研究，以进一步揭示藤茶总黄酮的抗肿瘤作用。　　1材料与仪器9　　1.1药物藤茶总黄酮由广西中医学院中药化学教研室通过柱层折提取分离，为一粉状淡黄色结晶，为黄酮类化合物，经含测，纯度为91.1%。　　1.2细胞人胃癌细胞SGC-7901，由广西中医学院分子生物学实验中心惠赠。　　1.3试剂RPMI-1640干粉(美国Gibco公司产

6、品)；新生牛血清（杭州四季青公司产品，批号031101）；四甲基二氮唑蓝（北京拜尔迪生物公司分装，Amresco0793）；二甲基亚砜（博大泰克公司产品）；0.25%胰蛋白酶(美国HycloneLab公司产品)；注射用生理盐水(徐州莱恩药业公司产品，批号051122)。　　1.4仪器SUNRISE自动酶标仪(奥地利TECAN公司产品)；311二氧化碳培养箱(美国ThermoForma公司产品)；DLF560型超净工作台(荷兰clearAirTechniekbv公司产品)；细胞培养瓶(加拿大BIOFIL公司产品)；96孔板(上海Sunub科技发展公司产品)；倒置显微镜(广西梧州光学

7、仪器厂产品)；微量移液器(法国Pipetman公司产品)；十万分之一电子天平(德国赛多利斯产品)。　　1.5培养液及试剂的配制9RPMI-1640不完全培养液，不加血清的RPMI-1640培养液;RPMI-1640完全培养液，10%新生牛血清＋RPMI-1640不完全培养液。　　2方法与结果　　2.1SGC-7901细胞培养在长满SGC-7901细胞的培养瓶内加0.25%胰酶，37℃消化3～4min，加培养液吹打，1∶3传代，3～5d长满。消化后计数，配制成10×104/ml细胞