食欲素A对人胃癌SGC7901细胞生长的影响

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1、研究生个人简介高之峰，男，1982年7月出生，江苏省赣榆县人2002-2007年就读于徐州医学院临床医学专业，通过大学英语六级。2007—2010年徐州矿务集团第二医院消化科工作，期间获得国家执业医师资格。2010—2013年徐州医学院消化内科硕士研究生学习，修满30学分，完成临床培训。目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯2英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27结{金⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯37攻读硕士学位期间发表学术论文题目⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45临床培训小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．46致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47论文独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48论文使用授权声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48论文审阅认定书⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49徐州医学院硕士学

4、位论文缩略词CytCddH20DMSOFBSFCMM[TTNCOAODPBSPI缩略词表AbbreviationCytochrormCDoubledistilledwater中文全称细胞色素c双蒸水Dimethylsulphoxide二甲亚砜FatalbovineserumFlowcytometry胎牛血清流式细胞术Methylthiazolyltetrazolium四甲基偶氮唑蓝Nitmcellulolse0rexinAOpticaldensivyPhosphatebufferedsalinepropidiumiodideSDS—PAG

5、Esodiumdodecylsulfate硝酸纤维素食欲素A光密度磷酸盐缓冲液碘化丙啶聚丙烯酰胺凝胶电泳徐州医学院硕士学位论文食欲素A对人胃癌SGC7901细胞生长的影响中文摘要目的观察食欲素A(OmxmA，OA)对体外培养的胃癌SGC7901细胞生长的影响，并初步探讨其影响胃癌细胞生长的机制。方法常规培养胃癌SGC7901细胞，单独食欲素A处理及SB408124预处理后再用食欲素A作用，MTT法检测药物对SGC7901细胞抑制率；Hoechst33258荧光染色法及流式细胞术观察细胞的形态变化及凋亡情况；Westernblot法检测Bc

6、b2、Bax、Cytc和活化Caspase．3蛋白的表达。结果MTr法显示，不同浓度的食欲素A对胃癌SGC7901细胞作用不同的时间后，其对细胞呈现剂量．时间依赖性的生长抑制，其中1．Opmol／L食欲素A作用24h后，对胃癌细胞生长的抑制作用最强，抑制率为65．32％+2．51％(P<0．01)；Hoechst33258荧光染色法显示，食欲素A组出现较多凋亡细胞：细胞核或细胞质内可见浓染致密的蓝色荧光，有明显的核固缩，凋亡率为20．55％±2．34％；采用食欲素A受体选择性拮抗剂SB408124(101．tmol／L)预处理后，可使胃癌

7、细胞的凋亡率明显降低到12．13％±3．44％(户<0．05)；流式细胞仪检测示1．01anx)l／L食欲素A作用24h后凋亡率为59．52％±1．38％，而SB408124预处理后，再用食欲素A处理24h，SGC7901细胞凋亡率降为38．96％±1．82％(尸<0．05)；Westernblot法结果提示，食欲素A可上调凋亡相关蛋白Bax、Cytc和活化CaSpase一3的表达，抗凋亡蛋白Bct-2的表达下降(P<0．05)；Orexin-1受体(OXlR)选择性拮抗剂SB408124预处理后，食欲素A作用减弱。结论食欲素A对体外培养

8、的胃癌SGC7901细胞生长具有明显的抑制和促凋亡作用；食欲素A的作用是通过其选择性受体实现的，促进了凋亡蛋白的表达、抑制了抗凋亡蛋白的表达。关键词食欲素A；SGC7901细胞；SB40812