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时间:2018-05-08
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1、白英水提物诱导人胃癌SGC作者:吴剑,李华,涂硕,余乐涵,万福生【摘要】 目的观察白英水提物(slt)对胃癌sgc-7901细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法常规法制备白英水提物;实验分正常对照组、白英处理组和顺铂处理组。白英处理组加入白英水提物终浓度分别为12.5,25和50mg/ml。mtt法检测细胞增殖抑制率,荧光显微镜观察sgc-7901细胞凋亡及形态变化,半定量rt-pcr分析基因bcl-xl,bid,caspase-9和caspase-3mrna表达。结果与正常对照组比较,3个剂量白英处理组sgc-790
2、1细胞增殖抑制均有显著性增加,且呈明显的时效和量效关系,细胞凋亡呈显著性增多(p<0.05),表现细胞核固缩、染色质凝集、边聚等;基因bcl-xlmrna表达显著性下降(p<0.05),bid、caspase-9和caspase-3mrna表达有显著性升高(p<0.05),并随白英浓度增加而加强。结论白英能剂量依赖性的抑制sgc-7901细胞增殖和诱导凋亡,其作用可能与调控bcl-xl、bid、caspase-9和caspase-3mrna表达相关。【关键词】白英;sgc-7901细胞;凋亡;基因表达
3、 abstract:objectivetoinvestigatetheeffectsofsolanumlyratumthunb.extract(slt)onapoptosisofhumanstomachcancersgc-7901cells.methodsdriedlyratumthunbanstomachcancersgc-7901cellslydividedintocontrolgroup,slt-treatedgroups(12.5mg/ml,25mg/ml,50mg/ml)andpositivecontro
4、l(25μg/mlddp).thegrottassay.morphologicalchangesofapoptosisicroscope.cellapoptosisrateinedbyfloetryandtheexpressofbcl-xl,caspase-9,caspase-3andbidmrnai-quantityrt-pcr.resultsparedanstomachcancersgc-7901cellsorphologyofsgc-7901cellsshoatincondensationandmarginati
5、on,andnochangesrnarnaannerinsgc-7901cellsoftheslt-treatedgroups.conclusionsltcaninduceapoptosisandinhibitproliferationofthehumanstomachcancersgc-7901cells,byregulatingexpressionofbcl-xl,caspase-9,caspase-3andbidgenes. keylyratumthunb.;stomachcancersgc-7901;apop
6、tosis;geneexpression 白英(solanumlyratumthunb.,slt)为茄科多年生草质藤本植物,又称白毛藤。.白英作为传统抗癌中药在肿瘤治疗方面应用广泛而且历史悠久,其主要成分含有甾体皂苷类、生物碱类及有机酸等多种化合物,具有抗肿瘤、抗炎、抗过敏等药理作用[1]。本实验室曾发现白英水提物能诱导宫颈癌hela细胞和肺癌a549细胞凋亡[2,3],但它对胃癌细胞凋亡的作用尚未能阐明。本实验以人胃癌sgc-7901细胞为研究对象,旨在探讨白英水提物的抗癌作用特点及其机制。 1材料 人胃腺癌细
7、胞株sgc-7901购于中科院上海细胞生物研究所。rpmi1640培养基、胎牛血清(fbs)、胰蛋白酶为gibco公司产品;碘化丙啶(pi)、蛋白酶k(proteinasek)和核糖核酸酶a(rnasea)、hoechst33342为sigma公司产品;四甲基偶氮唑蓝(mtt)(上海普飞生物技术有限公司),trizol试剂为invitrogen公司;顺铂为锦州九泰药业有限责任公司产品;pcr引物由上海生物工程公司合成。s,芬兰),pcr仪(杭州郎基公司产),dyy-6c型电泳仪(北京六一仪器厂产),紫外透射反射分析仪(
8、上海精科实业有限公司),gis-2009全自动数码凝胶图像分析系统(上海天能科技有限公司)。 2方法 2.1白英水提取物(slt)的制备 取白英(购买于江西南华医药有限公司中药材分公司,产地安徽)干品80g,用800ml水浸泡60min,加热沸腾60min,200目网筛过滤弃药渣,滤液以4000r/min的速度离心20min
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