隐丹参酮对人非小细胞肺癌抑制作用的研究

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1、中图分类号密级——隐丹参酮对人非小细胞肺癌抑制作用的研究Cryptotanshinoneinhibitslungtumorigenesisandinducesapoptosisincancercellsinvitroandinvivo计：学位论文：42页插图：11幅陈靓指导教师：王慧玲教括申请学位级别：硕士学位学科(专业)：内科学培养单位：大连医科大学附属第二医院完成时间：二0一四年五月答辩委员会主席：独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在指导教师指导下进行的研究工作及所取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包

2、含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：礁卫二年—三月二L日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以

3、下相应方框内打‘叫”)：1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密口。作者签名：1睐钍导师签名：日期：二口悼年f月，7日日期：年月曰目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5一(一，)日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．61．实验

4、材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1实验对象⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2主要药品及试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3主要仪器和实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．82．1操作流程⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．2隐丹参酮对体外细胞模型人非小细胞肺癌A549细胞的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一92．3隐丹参酮对体内荷瘤小鼠模型人非小细胞肺癌瘤体的影⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．13(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．体外细胞

5、实验的结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．荷瘤小鼠实验的结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．22(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．26(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．3l(二)参考文献⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．37四、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42大连医科

6、大学硕士学位论文隐丹参酮对人非小细胞肺癌抑制作用的研究硕士生姓名：陈靓指导教师：王慧玲教授指导小组：张雁山副主任医师专业名称：内科学摘要目的：研究隐丹参酮对体外人非小细胞肺癌A549细胞模型和体内人非小细胞肺癌荷瘤小鼠成瘤模型的抑制作用。方法：1，培养人非小细胞肺癌A549细胞，予以隐丹参酮干预，MTT法检测细胞生长情况，检测细胞集落形成情况，FCM检测细胞周期，Realtime—PCR检测相关细胞周期调控因子，以及利用WesternBlot检测细胞周期相关蛋白表达及细胞凋亡调控因子。2．构建人非小细胞肺癌荷瘤小鼠模型，移植部位皮下给予隐丹参

7、酮，检Nd,鼠生长及成瘤情况，并对肿瘤瘤块行免疫组化检测凋亡相关因子原位表达情况。结果：体外人非小细胞肺癌A549细胞模型研究发现隐丹参酮能抑制肿瘤细胞增殖及细胞集落形成，阻滞肿瘤细胞生长于细胞周期G2／M期，此期的细胞周期蛋白经WesternBbt方法检测提示CyclinB1、CDKl和CDC25C表达下调、P21CIPl／WAFl表达上升，而细胞凋亡调控因子Bel-2下降、P53和Bax上调，促使细胞发生凋亡。Realtime．PCR检测显示CCNBl(cyclinBl)、CDKI(CDC2)和CDC25C表达均下调(<0．5倍)，CDK

8、NlA(p21CIPl／WAFl)表达上调(>2倍)。体内小鼠模型研究发现隐丹参酮可减缓荷瘤小鼠体重下降，比对照组小鼠精神状态好，其瘤体生长速度减缓。病理学检测提示