小分子化合物对人肺癌a549细胞生长抑制作用研究论文

《小分子化合物对人肺癌a549细胞生长抑制作用研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、小分子化合物对人肺癌A549细胞生长抑制作用研究论文【摘要】研究小分子化合物苯并口恶嗪酮衍生物（BOD）对人肺腺癌细胞生长的抑制作用。方法用不同浓度的BOD处理体外培养的人肺癌A549细胞，应用倒置相差显微镜、MTT分析方法检测A549细胞形态学变化及细胞存活率的变化。结果BOD使A549细胞明显缩小、变圆；随着药物浓度的增加和处理时间的延长，细胞存活率明显下降。结论BOD可以抑制A549细胞的生长。【关键词】肺癌细胞生长苯并口恶嗪酮衍生物【Abstract】ObjectiveTofindtheinhibitionofBODtohumanlungcancerce

2、llgroicroscopyandMTTassayinemorphologicalchangesandcellviabilityrespectively.ResultsBODinducedthecellshrinkage,andmadesomecellsround.CellviabilitydecreasedentofBOD.ConclusionBODcouldinhibitedA549lungcancercellgrool/L乙二胺四乙酸(EDTA)(1∶1,V∶V)。置于37℃，5%CO2饱和湿度的培养箱中培养。实验中选用对数生长期细胞。1.3实验分组根据加

3、入的BOD药物浓度不同将细胞分组：①对照组；②溶剂对照组（DMSO）；③加药组（分别为50μM、100μM、200μM）。将各组细胞接种到24孔和96孔板中，每孔细胞浓度为1×104/ml，置于37℃，5%CO2饱和湿度的培养箱中培养24h后加药，分别于加药后24h和48h进行观察和分析。1.4细胞形态学观察各组细胞加药24h和48h后，倒置相差显微镜下观察24和48h细胞形态变化。1.5MTT法检测细胞琥珀酸脱氢酶的活性将上述培养于96孔板中的细胞根据实验分组加入不同浓度的BOD，于各组药物处理终止前4h每孔加入5mg/mlMTT液20μl，继续培养4h，然后

4、小心吸出各孔内培养液，加入100μlDMSO，振荡至结晶全部溶解，酶标仪上570nm测定光密度（OD值）。取各平行孔OD值的平均值,根据下式计算细胞相对存活率:存活细胞(%)=(实验组OD值/对照组OD值)×100%(以不含细胞的培养液为空白组调零)。1.6统计学处理实验数据以x±s表示,经t检验,P＜0.05表示有统计学意义。2结果2.1BOD对A549细胞形态学影响A549细胞经BOD（1～5#，表1）(200μM)处理24h后，在倒置显微镜下可见细胞明显缩小，有的细胞变圆，而且细胞的生长均受到抑制，其中BOD2#、3#和5#处理组的抑制作用尤其明显（图1)

5、。表1BOD1～5#化合物序号2.2BOD对A549细胞存活率的影响观察到细胞形态发生了明显变化之后,为了进一步证明BOD对A549细胞生长的抑制作用，我们用MTT法检测A：对照组；B：BOD1＃处理组；C：BOD2＃处理组；了各组BOD处理后琥珀酸脱氢酶的活性变化，发现BOD对A549细胞的影响呈浓度和时间依赖性关系。随药物浓度的增加，细胞存活率降低；随药物处理时间的延长，细胞存活率也降低。其中BOD2＃、3＃和5＃处理组细胞存活率降低尤其明显，这与形态观察结果一致（表2）。表2BOD1～5＃化合物对A549细胞存活率的影响注：与溶剂对照组相比*P＜0.05,

6、△P＜0.01,.freelicalgeics）是紧密连接化学、生物与医药领域的桥梁。基于传统遗传学筛选原理，化学遗传学方法是利用细胞渗透性的生物活性小分子，直接特异性地与靶分子（蛋白质或核酸）相结合，实时性激活或抑制靶分子功能，由此鉴定在生物学过程中起调节作用的蛋白质或基因，并了解其作用分子机制，也可由此找到有医药价值的小分子［7，8］。化学遗传学的手段是可控的和可逆的，可以随时加入或除去小分子化合物,从而启动或中断特定的反应。大多数小分子化合物对蛋白质的作用非常快,从而可以进行实时检测。此外,通过控制化合物的浓度,可以对其作用的靶分子的动力学过程进行分析。而

7、且一个同样的小分子化合物,可以被广泛地用于影响各种不同生物体的某一种过程或功能。因此，化学遗传学为创新药物的研究提供了新机遇。已有研究报道，一些小分子化合物可以通过抑制癌细胞的生长及引起癌细胞凋亡而起到抗癌作用［9］。一些小分子化合物，如黄樟素氧化物、吡唑羟基酯化合物等，可以明显的抑制A549细胞的生长，引起细胞凋亡或坏死。本文的研究结果表明，新合成的5种小分子化合物——BOD，随着浓度的增加和作用时间的延长，细胞存活率逐渐降低，尤以2＃、3＃和5＃化合物作用最为明显；细胞形态学研究结果证明，在BOD作用下，A549细胞明显缩小，细胞密度较对照组明显降低。证明B

8、OD能有效地抑制A549