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《补肾调经中药对多囊卵巢综合征患者子宫内膜整合素β3表达的影响论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、补肾调经中药对多囊卵巢综合征患者子宫内膜整合素β3表达的影响论文.freeletrialintegrinβ3ininfertilepatientse(PCOS)receivingovulationinductiontherapies.MethodsThirty-sixPCOSrelatedinfertilitypatients,receivingdifferentovulationinductiontherapies：17patientsofgroupAephinecitrate(CC)/humanchorionicgonadotropin(hCG)therapie
2、s,and19patientsofgroupBenaleinfactorsRNAexpressionsofintegrinβ3inmidlutealendometriumeasuredbyreversetranscription-polymerasechainreaction.Resultsparedetrialintegrinβ3ayinducethedeclineofendometriumreceptivityduringmidlutealphase,aypromote.Keyetrium;integrinβ3;polycysticovariansyndrome
3、胚胎着床是一个复杂的生理过程,受诸多因素调控。已有研究显示,.freelRNA表达的影响,探讨中药提高妊娠率的子宫内膜分子学基础。1资料与方法1.1研究对象与用药2008年2月-2009年2月就诊于本院妇科的多囊卵巢综合征(PCOS)患者36例,年龄23～38岁。原发或继发不孕,不孕时间2～9年。按2003年鹿特丹会议的PCOS诊断标准1,均经通液或碘油造影检查证实输卵管通畅,3个月内未用任何激素类药物。36例PCOS患者随机分为A组和B组。A组：共17例,月经周期第5日(自然周期或黄体酮后撤退性出血)给予克罗米芬(CC,枸橼酸氯米芬片,H20040352,Coda
4、lSyntoLimited)口服50mg/d,共5d;B组：共19例,月经周期第5日给予CC口服50mg/d,共5d,同时加服中药(基本方：当归、白芍、熟地黄、山茱萸、续断、菟丝子各15g,紫石英、香附、丹参、白术、茯苓各12g,柴胡9g),每日1剂。阴道B超监测卵泡发育,当优势卵泡直径≥18cm时,2组均给予注射用绒毛膜促性腺激素(hCG,国药准字H44020673,丽珠集团丽珠制药厂)10000IU肌肉注射诱发排卵。A、B组间年龄、体重指数比较,差异无统计学意义(P0.05)。对照组：选择同期因男性、输卵管因素不育而就诊、月经周期28～30d的妇女,共22例,年
5、龄23～37岁。3个月内未用任何激素类药物。对照组年龄与A、B组比较差异无统计学意义(P0.05),体重指数低于A、B组(P0.05)。1.2标本采集1.2.1血清性激素测定排卵后第7～8日取子宫内膜,当日抽血测血清雌二醇(E2)、孕酮(P)。1.2.2子宫内膜取材用小号刮匙刮取少许子宫内膜组织,贮藏于-70℃超低温冰箱。1.3检测方法和步骤1.3.1提取总RNA用小量组织总RNA抽提试剂盒提取总RNA。提取的RNA样品在波长260nm和280nm处吸光度(A)的比值保持在1.772～1.998之间,符合蛋白质污染容许容量,根据A值计算出总RNA浓度。1.3.2设计
6、引物3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)作为内参照,所有引物采用primer5.0引物设计软件设计。引物序列及扩增片段见表1。表1引物序列及扩增基因片段1.3.3扩增目的基因采用美国Promega公司AccessQuickTMRT-PCRSystem,分管在EppendorfPCR扩增仪上完成反转录和PCR的扩增。反应混合物包括PCR反应缓冲液25μL,RNA模板4.4μg,反转录酶5U,上、下游引物各为2.5μL,反应体系为50μL。引物序列及扩增基因片段见表1。反应程序为逆转录48℃45min,随后立即进行PCR扩增：94℃预变性4min,94℃变性45s,Int
7、egrinβ355℃、GAPDH50℃退火1min,72℃延伸1min,Integrinβ325个、GAPDH22个循环后,72℃总延伸10min。1.3.4半定量分析PCR产物经琼脂糖凝胶电泳分离、紫外透射/凝胶成像仪成像后进行半定量分析,标本Integrinβ3/GAPDH灰度值的比值代表Integrinβ3mRNA的半定量水平。1.4统计学方法差异显著性检验采用方差分析、两两比较,SPSS10.0软件包处理数据,α=0.05。2结果3组黄体中期血清性激素水平、Integrinβ3mRNA表达的比较见表2。3组着床期血清E2、P水平比较差异均无统计学意义(P
