多囊卵巢综合征患者子宫内膜ace2ang(17)mas轴的表达与意义

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1、中文摘要多囊卵巢综合征患者子宫内膜ACE2.Ang一(1—7)一Mas轴的表达及意义,■¨,’’’摘要目的:通过观察正常月经周期子宫内膜肾素一血管紧张素系统(renin.angiotensinsystemRAS)的两个轴系--ACE.AngII.ATlR/AT2R轴和ACE2.Ang.(1.7).Mas轴各组分的表达水平,证实子宫内膜局部存在RAS系统,并且推测其与卵巢激素水平的变化有关。通过检测多囊卵巢综合征(polycysticovarysyndromePCOS)患者子宫内膜上RAS不同组分的表达,观察其与正常增殖期子宫内膜表达的不同,探讨RAS的变化对于多囊卵巢综合征患者子宫内膜的影

2、响,以期为多囊卵巢综合征的发病机理、治疗途径提供一个新思路。方法:l研究对象1.1子宫内膜石蜡标本的收集选取河北医科大学第二医院病理科2009年12月至2011年6月期间部分石蜡包埋存档子宫内膜标本,为正常月经周期子宫内膜,共60例,年龄22--.一38岁,经病理检查内膜无病变,其中增殖期和分泌期各30例。1.2子宫内膜液氮标本的收集实验组:来源于2010年1月至2011年11月在河北医科大学第二医院妇科内分泌门诊和生殖医学科就诊的15例已婚PCOS患者,年龄24一--37岁,平均27.42士1.67岁。对照组:来源于同期就诊的15N不孕症患者(不孕原因为因输卵管因素或男方因素行IVF.E

3、T),年龄24-~38岁,平均30.70-士1.62岁。实验组月经稀发患者于月经周期的第8.14天或闭经患者于任一天,对照组于月经周期的第8.14天,两组均于宫腔镜检查术中无菌操作下刮取子宫前后壁,采集子宫内膜标本。所取标本一部分经10%甲醛固定,HE染色用于临床病理诊断;一部分迅速放入液氮中,随后转入.80℃冰箱中保存,以备RNA的提取,用于RQ.PCR定量分析。1.3入选标准:中文摘要PCOS的诊断参照2003年鹿特丹标准【8l:①稀发排卵或不排卵;②高雄激素血症的临床表现或高雄激素血症;⑧卵巢多囊样改变(一侧或双侧卵巢直径2.9mm的卵泡≥12个,或(和)卵巢体积≥10m1),以上@

4、③和/或②可诊断。对照组月经周期规则、性激素水平正常,盆腔超声检查无异常。所有选取病例均排除肾上腺或垂体等其他内分泌疾病和其他引起高雄激素的疾病,术前3个月内无激素类药物应用史,无心、肝、肾疾病史。2实验方法:常规HE染色判定所采集子宫内膜标本的组织学分期;采用免疫组化SP法检测AngII、ATlR、AT2R、ACE2、Ang-(1—7)、Mas在子宫内膜蛋白水平的表达;应用实时荧光定量PCR(RQ.PCR)方法检测ATlR、AT2R、ACE2及Mas在子宫内膜分子水平的表达。3统计分析:所有实验数据均采用均数±标准差(x士S)表示,使用SPSSl3.0统计软件进行统计学处理。资料符合正态

5、分布用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1免疫组化法检测AngII、ATlR、AT2R、ACE2、Ang.(1.7)、Mas结果AngII、ATlR、AT2R、ACE2、Ang.(1—7)和Mas蛋白阳性表达均呈棕黄色或棕褐色,主要定位在细胞膜和细胞浆中,大多呈弥漫性表达。1.1AngII在正常月经周期子宫内膜各期均有表达。增殖期主要存在于腺上皮,而分泌期则主要在子宫螺旋动脉管周间质细胞中(Fig.1)。1.2ATlR、AT2R在正常月经周期子宫内膜各期均有表达,呈周期性变化,在增殖早、中期表达逐渐增强,在增殖晚期和分泌早期含量达最高,于分泌中、晚期逐渐降低。主要存在于子宫内膜

6、腺体上皮中(Fig.2.3)。1.3ACE2在整个月经周期的子宫内膜均有表。在腺上皮表达强于间质,分泌期强于增殖期(Fig.4)。1.4Ang.(1—7)在整个月经周期子宫内膜的各期均有表达。在腺上皮表达强于间质,分泌期强于增殖期。(Fig.5)。1.5Mas在整个月经周期的子宫内膜各期均有表达。在腺上皮表达强于间质,分泌期强于增殖期(Fig.6)。中文摘要2RQ.PCR法检测ATlR、AT2R、ACE2、MasmRNA的结果2.1ATlRmRNA的表达正常月经周期子宫内膜增殖期及PCOS患者子宫内膜增殖期中均表达ATlRmRNA,结果分别为0.23+0.26、0.59-a:0.41。PC

7、OS患者子宫内膜增殖期ATlRrnRNA表达明显高于对照组增殖期宫内膜,且差异有统计学意义(P

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