青藤碱对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤mcp

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1、青藤碱对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤MCP作者：吴岚，周素娴，刘开祥，俸军林【摘要】目的探讨青藤碱(sinomenine,Sin)对糖尿病大鼠脑缺血再灌注损伤单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响。方法采用高脂高糖饮食加腹腔注射小剂量链脲霉素建立糖尿病大鼠模型，造模成功后将大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组、Sin低剂量治疗组和Sin高剂量治疗组。线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型。Sin低(30mg/kg)、高剂量(60mg/kg)治疗组于术前30min分别给予大鼠腹腔注射。采

2、用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测缺血90min再灌注24h大鼠额顶部皮质MCP-1和TNF-α含量的变化，并进行2，3，5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色和HE染色观察脑梗塞体积及病理形态学变化。结果①脑缺血再灌注24h，缺血再灌注组MCP-1和TNF-α含量明显升高，与假手术组比较，差异具有显著性(均P<0.05);与缺血再灌注组比较，Sin高、低剂量治疗组均显著减少MCP-1和TNF-α含量;高、低剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05);②Sin治疗组脑梗塞体积较缺血再灌注组减小，高、低

3、剂量组之间差异亦具有显著性(P<0.05);③Sin高、低剂量治疗组脑组织缺血损伤病理学改变明显轻于缺血再灌注组，Sin高剂量治疗组缺血改变亦轻于低剂量治疗组。结论Sin对糖尿病大鼠缺血再灌注脑损伤具有保护作用，其机制可能与降低缺血再灌注损伤脑组织MCP-1和TNF-α含量，抑制再灌注损伤炎症反应有关。【关键词】缺血再灌注;单核细胞趋化蛋白-1;肿瘤坏死因子-α;青藤碱　　Abstract：ObjectiveTostudytheeffectofsinomenine(Sin)onthecontentsofMC

4、P-1andTNF-αaftercerebralischemiareperfusion(I/R)injuryindiabeticrats.MethodsInthisexperiment,ratmodelofdiabetesmellitusadebyhighsucrose,fatdietandstreptozotioninjection.Diabeticratslydividedinto4groups,namelyshamoperatedgroup,I/Rgroup,loiddlecerebralarteryocc

5、lusion(MCAO)modeladebysuture-occludedmethod.Sininbeforefocalcerebralischemiaoperation.After90minMCAOfolloicfrontalandparietalcortex.HEstainingandTTCstainingoperatedgroup,thecontentsofMCP-1andTNF-αicterritory(P<0.05).paredeinloicimpairmentinloayreducedcereb

6、ralischemia-reperfusioninjurybydecreasingthecontentsofMCP-1andTNF-αindiabeticrats.　　Keyia-reperfusion;MCP-1;TNF-α;Sinomenine　　研究发现，白细胞早期穿过血脑屏障进入脑组织是再灌注后炎症反应的核心表现。笔者前期有研究证实[1]，脑缺血再灌注后炎症反应是造成再灌注损伤的主要原因之一。而在糖尿病高血糖情况下，明显加重的缺血性脑损伤可能与炎症反应密切相关。单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)是与单核/

7、巨噬细胞穿过血脑屏障浸润关系密切的趋化因子。青藤碱sinomenine,Sin是从中药青风藤SinomeniumacutumRehdetCP-1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量有影响尚未见报道，本实验进行了相关研究。　　1材料与方法　　1.1糖尿病大鼠模型建立及实验动物分组健康CP-1和TNF-α含量检测再灌注24h，立即将各组5只大鼠断头取脑，冰盘上快速取缺血侧额顶部皮质，用冰冷生理盐水冲洗掉血液，滤纸吸干水分,于低温环境下称重，置于含有冰冷生理盐水的玻璃匀浆器中(匀浆器放入冰浴中)制成质量分数为10%的

8、脑组织匀浆，然后放置于低温离心机中,4℃离心取上清液，ELISA法测定TNF-α和MCP-1含量。　　1.2.4TTC染色再灌注24h，将各组5只大鼠麻醉后开颅取脑。将鼠脑置于-4℃冰箱20min后，将其切成5等份冠状位切片，置于2%TTC溶液中，水浴、多聚甲醛液固定。用计算机病理图像分析仪及梯形法计算出梗塞灶体积，各脑片梗塞灶体积之和即为梗塞体积。左侧大脑半球梗塞灶区呈