加味左金丸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响

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1、加味左金丸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响作者：胡运莲　刘桂喜　谭大琦【摘要】　　［目的］观察加味左金丸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原(PA，用增殖指数PI表示）和端粒酶活性（用hTERT表示）的影响。［方法］采用甲硝基亚硝基胍（MNNG）、0.03%雷尼替丁、56℃15%盐水、0.85%脱氧胆酸钠、40%乙醇、饥饱失常等多种因素制作大鼠胃癌前病变模型和免疫组化方法检测正常组、自然恢复组、加味左金丸高、中、低剂量组、维甲酸组大鼠胃黏膜组织中PA（换算成增殖指数PI）和hTERT蛋白表达情况。［结果］（1）加味左金丸高、中、低组PI与维

2、甲酸组比较差异有统计学意义（P＜0.05），这四组均与自然恢复组比较差异有统计学意义(P<0.01或0.05)。（2）加味左金丸各组及维甲酸组hTERT蛋白阳性率均较自然恢复组降低，但仅中剂量组有统计学意义(P<0.05)。［结论］加味左金丸通过抑制端粒酶及细胞增殖活性，发挥逆转胃癌前病变的作用。【关键词】胃肿瘤　癌前病变　端粒酶　增殖细胞核抗原　加味左金丸　　EffectofAdjustedZuoJinPillsonProliferatingCellNuclearAntigenandTelomeraseActivityinRatsera

3、seactivity(representedbyhumantelomerasereversetranscriptase,hTERT)inratsodeldeoxycholate,40%alcoholstimulus,0.03%ranitidine，unduehunger,overeating.PA(convertedtoPI)andhTERTmunohistochemicalmethod,innormalgroup,sponsaneousrecoverygroup,AZPgroupsofhigh?鄄dosage,medium?鄄dosage,loed

4、ium,andloedium?鄄dosageAZPgroupandthesponsaneousrecoverygroup(P<0.05).［Conclusion］AZPmakesGPLreversedinratesbyinhibitingactivityoftelomeraseandcellproliferating.Keys;precancerouslesions;telomerase;proliferatingcellnuclearantigen;adjustedZuoJinpills近年研究表明，端粒酶活化是细胞保持持续分裂增殖的基础，与

5、细胞的异常增殖密切相关，是肿瘤发生学上的一个共同途径，在肿瘤的发生发展中起非常重要的作用[1]。增殖细胞核抗原（PA）是目前被公认的能较好地判断细胞增殖状态的一项指标。关于胃癌、胃癌前病变中端粒酶活性和细胞增殖活性以及两者相关性的研究已有较多报道，但中西药物对其活性影响的临床或/和实验研究报道则不多见。加味左金丸是全国第二批名老中医药专家程丽芳教授的经验方，原汤剂临床应用30余年，治疗萎缩性胃炎及其癌前病变疗效肯定[2]。在实验病理学研究[3]的基础上，笔者又从蛋白水平探讨了其部分作用机制，现就其对大鼠胃癌前病变PA和端粒酶活性的影响报告如下。1材料

6、与方法1.1主要药品、试剂及仪器甲硝基亚硝基胍（MNNG）为Fluka公司产品，用双蒸水配成1g/L的母液4℃避光储存，每周配1次，临用时用双蒸水配成所需浓度；脱氧胆酸钠购自湖北省医药公司；维甲酸由上海第六制药厂生产；雷尼替丁由杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司生产；75%乙醇，用双蒸水稀释成40%的浓度；加味左金丸水煎液由黄连6g、吴朱萸6g、党参10g、茯苓10g、醋柴胡10g、白芍15g、法半夏10g、三七粉3g(冲)、莪术10g、白花蛇舌草15g、百合10g、炙甘草6g组成，由湖北省中医院中药制剂室供给，浓度为2g/ml。即用型PA单抗、即用

7、型端粒酶催化活性亚单位（hTERT）多抗、SP试剂盒、DAB即用型显色试剂盒均购自北京中山生物技术公司。显微摄像全自动图像分析仪由武汉大学医学院病理教研室提供，软件为同济千屏影像工程公司HPIAS2000型图像分析软件。1.2造模及给药方法选用SPF级6周龄SD雄性大鼠60只，体重100g~120g（武汉市疾病预防控制中心提供）。造模参照严茂祥[4]综合方法并加以改进。大鼠自购进后适应性喂养1周。从60只大鼠中随机抽取10只作为正常组，其余50只用于造模。正常组大鼠不做任何处理；造模大鼠每日自由饮用100μg/mlMNNG液(饮料瓶用油漆涂黑避光)、

8、进食含0.03%雷尼替丁的纯鼠饲料、上午用56℃、15%的氯化钠液按10ml/kg灌胃，进食2d、禁食1d，