药学毕业论文--维a酸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响

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1、维A酸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响作者:杨赤兵,谭大琦,李卫星,姜楠【摘要】目的观察维A酸(RA)对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原(PCNA,用增殖指数PI表示)和端粒酶活性(用hTERT表示)的影响。方法采用甲硝基亚硝基胍(MNNG)、0.03%雷尼替丁、56℃15%盐水、0.85%脱氧胆酸钠、40%乙醇、饥饱失常等多种因素制作大鼠胃癌前病变模型,免疫组化方法检测正常组、自然恢复组、RA20mg/kg和RA40mg/kg组大鼠胃黏膜组织中PI和hTERT蛋白表达情况。结果正常组和RA40mg/kg组PI、hTERT蛋白阳性率均较自然恢复组低,差异有显著性(P<0

2、.01或P<0.05)。结论维A酸可能是通过抑制端粒酶及细胞增殖活性,发挥逆转胃癌前病变的作用。【关键词】维A酸;癌前病变;增殖细胞核抗原;端粒酶  Abstract:ObjectiveToobservetheeffectofretinoicacid(RA)onproliferatingcellnuclearantigen(PCNA,representedwithproliferatingindex,PI)andtelomeraseactivity(representedwithhumantelomerasereverse9transcriptase,hTERT)inratswit

3、hgastricprecancerouslesion.MethodsThemodelwasestablishedbyMNNGtogetherwithotherfactorsincluding15%56℃brine,sodiumdeoxycholate,40%alcoholstimulus,0.03%ranitidine,unduehunger,andovereating.PCNA(convertedtoPI)andhTERTwasdetectedbyimmunohistochemicalmethod,innormalgroup,spontaneousrecoverygroup,andRA

4、(20mg/kgand40mg/kg)group.ResultsPIandhTERTofnormalgroupandRA40mg/kggroupswerelowerdetectedthanspontaneousrecoverygroupandwassignificantlydifferent(P<0.01orP<0.05).ConclusionRAmakesGPLreversedinratesbyinhibitingactivityoftelomeraseandcellproliferating.  Keywords:retinoicacid;precancerouslesi

5、ons;proliferatingcellnuclearantigen;telomerase  利用某些化学物质诱导肿瘤细胞分化为正常细胞或近似正常细胞,已成为抗肿瘤药物研究的热点,维A酸是肿瘤分化诱导剂的代表之一。维A酸对多种化学致癌过程和诱癌作用有抑制作用,具有逆转胃癌前病变大鼠的肠化生和不典型增生作用,对急性早幼白血病M9型的疗效,已被证实和公认[1,2]。为进一步探讨其作用机理,本文观察维A酸对大鼠胃癌前病变增殖细胞核抗原和端粒酶活性的影响,报告如下。  1材料  1.1实验动物SPF级,雄性Wistar大鼠,6周龄,体质量100~120g,由湖北省实验动物研究中心提供,生产许可

6、证号:SCXK(鄂)2003-0005。  1.2主要药品及试剂维A酸(RA),上海第六制药厂;甲硝基亚硝基胍(MNNG)为Fluka公司产品;脱氧胆酸钠,北京双旋微生物培养基制品厂;雷尼替丁,杭州赛诺菲圣德拉堡民生制药有限公司;无水乙醇,上海振新兴化工一厂;氯化钠,天津化学试剂三厂;即用型PCNA单抗、即用型端粒酶催化活性亚单位(hTERT)多抗试剂盒、SPDAB即用型显色试剂盒均购自北京中山生物技术公司。  1.3主要仪器CUT5062轮转切片机,德国SLEE公司;BX40系统显微镜,日本OLYMPUS公司;HPIAS1000型显微摄像全自动图像分析仪,同济千屏影像工程公司。  29

7、方法  2.1造模及给药方法按综合法复制模型[3]。大鼠50只,随机抽取11只作为正常对照组,其余39只用于造模。正常对照组大鼠不做任何处理;造模大鼠每日自由饮用100μg/mLMNNG液(新鲜配制,饮水瓶用油漆涂黑避光),上午用56℃、ρ=15%的氯化钠液10mL/kg灌胃。摄食为含ρ=0.03%雷尼替丁的纯鼠饲料,饥饱相间,进食2d的当天下午,用ρ=0.85%脱氧胆酸钠溶液按10mL/kg灌胃;禁食1d的当天下午,用φ=40%乙

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