魔芋葡甘聚糖测定方法的比较研究（1）

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1、万方数据检测分析食品研究与开发2009年2月第30卷第2期魔芋葡甘聚糖测定方法的比较研究阎华，沈秀荣(襄樊学院化学与生物科学系，湖北襄樊441053)ll==-摘要：在用DNS法测定魔芋葡甘聚糖的含量过程中，以丙三醇代替苯酚。结果表明，与苯酚法相比，丙三醇法既能保证结果的准确可靠。又具有方便、安全、成本低等优点，适合于实验室快速测定魔芋粉葡甘聚糖定量。关键词：魔芋；葡甘聚糖；比色法；丙三醇；苯酚ACOMPARATIVESTUDY0NDETERMINATIONOFGIJUCOMANNANFROMKONJACPOWDERYANHua，S

2、HENXiu-rong(DepartmentofChemistryandBiologicalScience，XiangfanUniversity，Xiangfan441053，Hubei，China)Abstract：TheauthortriedtousetheDNScolorimetrythatcontainglycerolinsteadofphenoltodeterminecontentofkonjacglucomannan．Theresultindicatedthatthismethodiscredible，convenien

3、t，innocuous，andcostlower,andfitforthecommonkonjacglucomannanquantitativeanalysis．Keywords：konjac；glucomannan；colorimetry；glycerol；phenol葡甘露聚糖含量的测定方法有多种。主要有费林滴定法IIl、甘露糖腙重量法i21、苯酚比色法[31、3，5一二硝基水杨酸比色法、高效液相色谱法14等。其中3，5一二硝基水杨酸比色法不需要昂贵的大型分析仪器，操作较简便，因此是魔芋葡甘露聚糖测定较为理想的方法。但是，该方法

4、同样要使用一定数量的苯酚。同样对试验者造成影响，目前有用丙i醇代替苯酚测定马铃薯等作物还原糖的报道151。本文尝试用无毒的丙三醇代替苯酚，讨论其对魔芋葡甘聚糖含量测定结果的影响。1材料与设备1．1魔芋精粉由湖北天葡生物科技有限公司提供。1．2所需仪器设备722分光光度计：上海第三分析仪器厂；JZ一781型电磁搅拌器：杭州通用电子仪表厂；TGL一16C高速离心机：上海安亭科学仪器厂；等。2方法2．1显色剂的配制方法2．1．1丙三醇显色剂(DNSI)基金项I：1：湖北省教育厅科学基金嚣点项目(D200625005)作者简介：阎华(197

5、8一)，男(汉)，讲师，硕j：，主要从事农产品加工方向研究。准确称取无水的3．5一二硝基水杨酸6．5g溶解待用。无水氢氧化钠40g溶解后移入500mL容量瓶，冷却后定容。将水杨酸溶解液移入1000mL容量瓶并加入325mL的氢氧化钠溶液。加入40g酒石酸钾钠和1．8g亚硫酸钠．再加入15mL丙三醇溶解定容至1000mL贮存于棕色试剂瓶中。2．1．2苯酚显色剂(DNS11)嘲A液：溶解6．9g结晶的蓖蒸馏的苯酚于15．2mL10％氢氧化钠溶液中．稀释至69mL，在此溶液中加入6．9g亚硫酸氢钠。B液：称取225g酒石酸钾钠，加入到30

6、0mL10％氢氧化钠溶液中。再加入880mLI％3，5一二硝基水杨酸溶液。将A液与B液混合，贮于棕色试剂瓶中。在窜温下，放置7d～10d以后使用。2．2魔芋葡甘聚糖测定液的制备方法准确称取样品0．1950g．加入盛有50mL甲酸一氢氧化钠缓冲液并处于电磁搅拌状态的100mL容量瓶中，30℃搅拌溶胀4h，溶胀过夜，用甲酸一氢氧化钠缓冲液定容至100mL。搅拌均匀后在离心机上以4000dmin离心20min，此上清液即为魔芋葡甘聚糖提取液．该步骤去除了魔芋粉中的游离还原糖对测定结果的影响。准确移取25．0mL魔芋葡甘聚糖提取液于100m

7、L容量瓶中，准确加入3mol／L硫酸20mL，摇匀。在沸水浴中具塞密封水解1．5h，冷却。加入6mol／L氢氧化钠20mL，摇匀，加蒸馏水定容至100mL，即得万方数据—===112-待测液。2．3样品测定菇0030鬻2知食品研究与开发第卷笫期妖口口Wi几叫丌蹑检测分析2．3．1建立标准曲线依次移取0．4、0．8、1．2、1．6、2．0mL标准葡萄糖1二作液、2．0mL蒸馏水于6个5mL比色管中，加蒸馏水补足至2mL．再在每个容量瓶中加入2．0mL显色剂DNSI(或DNSII)，摇匀后将6个容量瓶放在沸水浴中加热5rain，立即冷却

8、。用蒸馏水定容至刻度，摇匀。以蒸馏水显色反应液做空白调零，用lcm比色皿在556IIlTI处测其吸光值。记录不同浓度葡萄糖工作液的吸光值A。以吸光度为纵坐标(M)，葡萄糖毫克数为横坐标(A)，绘制标准T作曲线。2．3．2样品葡甘聚糖测