选择性COX2抑制剂NS398对前列腺癌PC3细胞增殖与凋亡的影响.doc

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1、选择性COX2抑制剂NS398对前列腺癌PC3细胞增殖与凋亡的影响【摘要】目的观察环氧化酶2(COX2)抑制剂NS398对前列腺癌细胞PC3增殖和凋亡的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测不同浓度和不同时间NS398对PC3细胞增殖的影响；RTPCR法检测不同浓度NS398作用PC3细胞24h后COX2mRNA的表达；酶联免疫测定法(ELISA)检测不同浓度NS398作用PC3细胞24h后PGE2释放水平；流式细胞仪检测不同浓度NS398作用PC3细胞24h后细胞凋亡情况。结果NS398可以抑制

2、PC3细胞的增殖，呈时间和剂量依赖性；RTPCR和ELISA法检测结果显示，随着NS398浓度增高，PC3细胞COX2mRNA表达和PGE2释放水平呈下调趋势；细胞凋亡检测结果显示100、200μmol/LNS398对PC3细胞具有诱导凋亡的作用。结论NS398可能通过COX2依赖性途径抑制前列腺癌PC3细胞增殖，促进肿瘤细胞凋亡。【关键词】前列腺癌；环氧化酶抑制剂；增殖；凋亡ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheeffectofcyclooxygenase2inhibitorNS

3、398ontheproliferationandapoptosisofprostatecancercelllinePC3invitro.MethodsTheproliferativeinhibitionofPC3cellswasobservedbymethylthiazoltetrazolium(MTT)rapidphotocolorimetricassay;theexpressionofCOX2mRNAinculturedPC3cellswasexaminedbyRTPCR;thereleaselevelsofPG

4、E2wasmeasuredbyenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA);PC3cellsculturedindifferentconcentrationsofNS398mediumfor24hwasmarkedwithAnnexinVFITCandPIforthecellapoptosisassaybyflowcytometry.ResultsAfterthePC3cellsweretreatedwithdifferentconcentrationsofNS398,theinhibit

5、oryrateonproliferationincreasedwiththeincreasingofconcentrationanddays.TheexpressionofCOX2mRNAandthereleaselevelsofPGE2weredecreasedcomparedwiththoseofthecontrolgroup.PC3cellsculturedin100and200μmol/LNS398mediumfor24hhadsignificantlyhigherincidenceofapoptosis.Conc

6、lusionNS398caninhibitproliferationofhumanprostatecancercelllinePC3andinduceitsapoptosisinvitro,whichmaycontributedtotheCOX2dependentpathway.KEYWORDS:prostatecancer;cyclooxygenaseinhibitor;proliferation;apoptosis　环氧化酶2(COX2)是近年来国内外研究的热点，其在包括前列腺癌等多种恶性肿瘤中呈阳性表达[1]，因

7、而选择性阻断或抑制COX2的活性，可能有利于前列腺癌的预防和治疗。我们利用选择性COX2抑制剂氮2，环己氧4，硝基苯甲基磺胺(NS398)干预前列腺癌PC53细胞，观察其对前列腺癌细胞增殖和凋亡的影响，并初步探讨其可能存在的机制。1材料与方法1.1材料人前列腺癌细胞株PC3细胞(中国科学院上海细胞生物研究所)；NS398(美国Sigma公司)；5%四甲基偶氮唑蓝(MTT溶液，美国Sigma公司)；胰蛋白酶、RMPI1640培养基、小牛血清(美国Gibco公司)；PGE2酶联免疫测定试剂(苏州大学医学院血栓研究所

8、)。1.2方法1.2.1细胞培养PC3细胞在10%灭活小牛血清的RPMI1640培养基中，37℃、5%CO2、饱和湿度的恒温培养箱内培养，细胞增殖覆盖培养瓶底面积90%时，0.25%胰蛋白酶消化收集细胞传代或用于实验。1.2.2NS398对PC3细胞增殖影响的检测制备P