cox2抑制剂干预对体外培养的ems间质细胞增殖的影响

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1、山东大学硕士学位论文COX-2抑制剂干预对体外培养的EMs间质细胞增殖的影响硕士研究生林常荣硕士生导师田永杰副教授中文摘要目的(1)观察COX．2抑制剂对体外培养的内异症间质细胞增殖的影响。(2)探讨COX．2抑制剂对体外培养的内异症细胞干预的机制。(3)探讨COX．2抑制剂在治疗子宫内膜异位症中的应用价值。方法实验标本选取12例异位内膜标本取自山东省立医院妇产科2006年3月至2007年1月因卵巢型内异症行手术的患者，均经病理证实为EMs。正常对照组：25例取自同期因各种原因行诊断性刮宫或宫腔镜检查后经病理学诊断为正常的增生期或分泌期的子

2、宫内膜标本。无菌收集实验组患者异位囊肿增厚的部分囊内壁及对照组内膜组织进行，一部分用10％多聚甲醛固定，用于组织学研究，一部分分离间质细胞培养，用于Nimesulide与Celecoxib对异位内膜细胞增殖影响的研究。步骤如下：1．取10％多聚甲醛中固定的异位内膜及正常内膜组织，脱水、包埋、切片，烤干。石蜡切片行HE染色，并行免疫组化检测COX-2水平。2．分离并培养内膜间质细胞，传代并进入对数生长期后分别行Celecoxib及Nimesulide干预，MTT法检测不同浓度及时间下抑制率，绘制细胞生长曲线。3．EIA法检测COX．2抑制剂干

3、预后PGE2水平。4．流氏细胞术检测COX．2抑制剂干预后凋亡率及细胞周期分布。结果1．免疫组化检测COX-2水平异位内膜组COX-2水平显著高于对照组(P

4、加，与对照组相比有统计学意义，且呈时间浓度剂量依赖关系。5．细胞周期检测流氏细胞术检测结果显示，COX．2干预后的细胞，其位于Go／Gl期比率明显增加，与对照组相比有统计学意义，且呈时间浓度剂量依赖。结论1．COX．2在内异症发生及发展中起重要作用2．COX一2抑制剂可以明显抑制体外培养的内异症间质细胞，并呈时间浓度计量依赖性3．COX．2抑制剂通过COX-2依赖及非COX．2依赖途径抑制间质细胞的增殖：(1)COX．2抑制剂通过抑制COX．2的表达，减少PGE2的产生，并可能进而下调芳香化酶、E2及VEGF等的表达，发挥对异位内膜的抑制作

5、用。(2)COX．2抑制剂通过明显上调异位内膜间质细胞凋亡，并使细胞在Go／G,期停滞，发挥对内异症间质细胞增殖的抑制作用；关键词COX．2抑制剂子宫内膜异位症细胞凋亡细胞增殖2山东大学硕士学位论文ExperimentalstudyofeffectsofCOX一2inhibitorsonthecellsofEndometriosisculturedinvitroPostgraduateSupervisorLinChangrongTianYongiieAbstractObjectives1．ToexploretheinfluenceofCOX

6、·2inhibitorsontheendometrioticstromalcellsculturedinvitro；2．ToexplorethemechanismofinhibitoryinfluenceofCOX一2inhibitorsontheendometrioticstromalcells；3．ToevaluatethepracticalvalueofCOX-2inhibitorintreatingendometriosis．MethodsEndometriotictissuewaspickedfrom12patientsofEMs

7、fromMarch2006toJanuary2007whounderwentsurgeryinourdepartment，andallofthemwereconfirmedendometriosisbyhistologyexamination．Weused25normaldendometriumpickedfrompatientswhounderwentdiagnosticcurettageandlaparoscopy．Alltheendometriumweredividedintotwogroups．onegroupWasfixedbyi

8、mmersionin10％bufferedformalinfor6_-24h，embeddedinparaffinandsectionedat6nil／1，andmountedo