不同浓度rhepo对神经干细胞体外培养增殖的影响

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1、不同浓度rhEPO对神经干细胞体外培养增殖的影响作者：胡萌，吕刚，梅晰凡，张世民【摘要】目的观察不同浓度rhEPO对神经干细胞体外培养增殖的影响，探讨rhEPO联合神经干细胞移植治疗脊髓损伤修复的影响。方法用不同浓度(5、50、500U/mL)rhEPO干预从新生SD大鼠(出生24h以内)取材来的神经干细胞，分别检测每组神经干细胞克隆形成率;在不同时间分别用MTT法检测细胞增殖率;神经干细胞分化的免疫细胞化学染色及计数。结果添加rhEPO各实验组细胞增殖较快最终神经球的数量多于对照组,以50U/mLrhEPO组作用显著;添加rhEP

2、O各实验组的细胞生长曲线均高于对照组,尤其是50U/mLrhEPO组显著高于对照组;NSE和GFAP免疫细胞化学染色和计数结果显示,50U/mLrhEPO组中NSE免疫阳性细胞明显多于对照组(P<0.01)。结论rhEPO对神经干细胞体外培养增殖有促进作用，尤以适中浓度(50U/mL)作用更加明显。【关键词】神经干细胞;rhEPO;体外培养;增殖Abstract:ObjectiveToobservetheeffectwhichmultipliesinvitroraisetothenervestemcellofdifferent

3、densityrhEPO,andtodiscusstheinfluenceofrhEPO,associatedwithnervestemcelltransplant,incuringspinalcorddamagerepair.Methods11Thepresentresearchfirstlyintervenedthenervestemcell,obtainedfromthenewbornSDbigmouse(bornwithin24hs),withdifferentdensityrhEPO(5,50,500U/mL).Then,

4、adistinctiveexaminationoftherateofcloneformationineachgroupsnervestemcellswasconducted.Afterwards,MTTmethodwasusedtoexaminethecellreproducibilityindifferenttimesandnervestemcelldifferentiationsimmunocytochemistrydyeingandcounting.ResultsThecellmultiplicationinexperim

5、entalgroupswhichhadaddedtheEPOwasquickerandthequantityoffinalnerveballswaslargerthanthatinthecontrolgroup,whichwasremarkablein50U/mLEPOgroup.ThecellgrowthcurveinexperimentalgroupswhichhadaddedtherhEPOwashigherthanthatinthecontrolgroup,whichwasalsoremarkablein50U/mLEPOg

6、roup.TheNSEandGFAPimmunocytochemistrydyeingandthecountingresultsshowedthattheNSEimmunitymasculinecellsinthe50U/mLEPOgroupwereobviouslymorethanthatinthecontrolgroup(P<0.01).ConclusionsrhEPOhasthepositiveeffectonthenervestemcellinvitroraisemultiplication,whichismoreob

7、viouswiththemoderatedensity(50U/mL).　　Keywords:nervestemcell;rhEPO;invitroraise;multiplication11　　神经干细胞(nervestemcell,NSCs)是一种具有复制能力和多向分化潜能的原始细胞，在中枢神经系统损伤的修复研究中逐渐引起医学界的关注。近年来的研究发现，神经干细胞不仅存在于胚胎脑组织,而且已发育成熟的内也存在神经干细胞[1]。正常情况下这些NSCs处于“静止”或“休眠”状态，在特定因素的作用下，例如损伤或刺激，其分裂、分化的潜能

8、就被激活，从而出现增殖现象。碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblastgrowthfactor,bFGF)对离体神经干细胞具有一定的增殖效应，但其作用有限[2]。因此，如何更有效的促进NSCs的增殖是推动其在治疗过程中的重